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【求助/交流】PCR求助
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lliuzhi
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注册: 2008-04-20
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专业: 高分子合成化学
[交流]
【求助/交流】PCR求助
已有9人参与
本人做的是普通PCR,刚开始做一直有目的产物,用的是生工的Taq酶,但是总会出现阶段性没有产物的情况,甚至都没有非特异性产物和引物二聚体。之前怀疑是酶出了问题或者是模板降解了,但是经检测后模板没有问题,也换了Taq、 TAKARA的Extaq、rtaq、生工的Pfu、可是仍旧没有产物,后来偶然用同样的东西又能P出来了,但是很不稳定,过几天又没有了,请问高手是什么问题呢
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1楼
2011-03-17 08:53:50
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lliuzhi
金虫
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性别: GG
专业: 高分子合成化学
谢谢大家的帮助。
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10楼
2011-03-20 08:19:57
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scelab
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性别: GG
专业: 环境微生物学
管辖:
微生物
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):给个红包,谢谢回帖交流
每次做3个平行,减少偶然因素
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小木虫之有关部门负责人
2楼
2011-03-17 09:12:44
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xwsooo
银虫
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虫号: 1014771
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专业: 临床生物化学检验
★ ★ ★
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scelab(金币+2): 有道理 2011-03-17 10:52:22
检查实验记录,何时做出来,何时又没有;还有,加样时要准确,特别在微量情况下,误差容易变大。这是我的一点体会。还有,可能就是体系还不完善,才会出现如此貌似怪异的事件。
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3楼
2011-03-17 10:26:09
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虫号: 223239
注册: 2006-03-21
专业: 生物物理化学
★
小木虫(金币
+0.5
):给个红包,谢谢回帖交流
第一次做不出来的时候,二次PCR,我有的甚至做过三次PCR,能出结果
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不在沉默中爆发,就在沉默着死亡!
4楼
2011-03-17 10:40:58
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