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lliuzhi

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】PCR求助 已有9人参与

本人做的是普通PCR,刚开始做一直有目的产物,用的是生工的Taq酶,但是总会出现阶段性没有产物的情况,甚至都没有非特异性产物和引物二聚体。之前怀疑是酶出了问题或者是模板降解了,但是经检测后模板没有问题,也换了Taq、 TAKARA的Extaq、rtaq、生工的Pfu、可是仍旧没有产物,后来偶然用同样的东西又能P出来了,但是很不稳定,过几天又没有了,请问高手是什么问题呢
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xwsooo

银虫 (小有名气)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
scelab(金币+2): 有道理 2011-03-17 10:52:22
检查实验记录,何时做出来,何时又没有;还有,加样时要准确,特别在微量情况下,误差容易变大。这是我的一点体会。还有,可能就是体系还不完善,才会出现如此貌似怪异的事件。
3楼2011-03-17 10:26:09
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scelab

荣誉版主 (文坛精英)

小木虫之有关部门负责人


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
每次做3个平行,减少偶然因素
小木虫之有关部门负责人
2楼2011-03-17 09:12:44
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飘在海上的雪

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
第一次做不出来的时候,二次PCR,我有的甚至做过三次PCR,能出结果
不在沉默中爆发,就在沉默着死亡!
4楼2011-03-17 10:40:58
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Allanflying

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
影响因素会很多,PCR仪有时候还抽疯呢
5楼2011-03-17 11:25:18
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