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凌-强

银虫 (小有名气)


[交流] 【求助/交流】Msp I 和Hha I 的最佳酶切体系和酶切时间

准备用Msp I 和Hha I做酶切,实验室没人用过这两种酶,找寻下,看有人做过没有,最佳体系,还有酶切时间,3Q
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weishengsu5

木虫 (正式写手)



凌-强(金币+1):谢谢参与
引用回帖:
Originally posted by 凌-强 at 2011-03-11 16:22:24:
准备用Msp I 和Hha I做酶切,实验室没人用过这两种酶,找寻下,看有人做过没有,最佳体系,还有酶切时间,3Q

有大虾知道的么,学习下
2楼2011-03-11 17:33:05
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凌-强(金币+1):谢谢参与
凌-强(金币+1): 谢谢,挺详细的,我再学学 2011-03-13 09:44:32
首先你酶切是验证呢还是要进行下游工作,如果是验证的话10ul体系足矣,
如果是下游工作,一般我们是50ul体系 37度 2小时或者更长
质粒:需定量;
酶:各1-2ul
Buffer:一倍的话加5ul,两倍的加10ul
ddH2O:补至50即可;

其实建议楼主先看看用的这个酶是哪个公司的,fermentas的还是TAKARA的或者别的神马公司,buffer上面一般都会说一倍还是2倍的!
3楼2011-03-11 18:08:14
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