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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】Msp I 和Hha I 的最佳酶切体系和酶切时间
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凌-强

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】Msp I 和Hha I 的最佳酶切体系和酶切时间

准备用Msp I 和Hha I做酶切，实验室没人用过这两种酶，找寻下，看有人做过没有，最佳体系，还有酶切时间，3Q
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1楼 2011-03-11 16:22:24
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weishengsu5

木虫 (正式写手)
★
凌-强(金币+1):谢谢参与
引用回帖:
Originally posted by 凌-强 at 2011-03-11 16:22:24:
准备用Msp I 和Hha I做酶切，实验室没人用过这两种酶，找寻下，看有人做过没有，最佳体系，还有酶切时间，3Q

有大虾知道的么，学习下
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2楼2011-03-11 17:33:05
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天使托

专家顾问 (职业作家)
★
凌-强(金币+1):谢谢参与
凌-强(金币+1): 谢谢，挺详细的，我再学学 2011-03-13 09:44:32
首先你酶切是验证呢还是要进行下游工作，如果是验证的话10ul体系足矣，
如果是下游工作，一般我们是50ul体系 37度 2小时或者更长
质粒：需定量；
酶：各1-2ul
Buffer：一倍的话加5ul,两倍的加10ul
ddH2O：补至50即可；

其实建议楼主先看看用的这个酶是哪个公司的，fermentas的还是TAKARA的或者别的神马公司，buffer上面一般都会说一倍还是2倍的！
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3楼2011-03-11 18:08:14
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