24小时热门版块排行榜    

查看: 1135  |  回复: 6
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

xiaoyu1014126

木虫 (正式写手)


[交流] 【求助/交流】大家酶切的体系都是什么样的呢?

每个实验室,甚至每个实验者都有自己的酶切体系,大家的酶切体系是什么样的呢?
多少体积?组成?818吧
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

» 抢金币啦!回帖就可以得到:

查看全部散金贴

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

翱宇

禁虫 (正式写手)


xiaoyu1014126(金币+1): 2011-03-02 11:53:35
我一般是用50ul的体系:
质粒加20-30ul
buffer    5ul
酶为    1.5-2ul
加BSA和水补足体系

但如有时要经过多次酶切、补平,则最开始的体系要大一些,80-100ul也可以,质粒多一些!
5楼2011-03-01 22:47:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答
★ ★
xiaoyu1014126(金币+1): 2011-03-01 18:41:39
amisking(金币+2): 辛苦。 2011-03-01 19:34:51
我喜欢用30ul的体系

n ul PCR产物或者 DNA

1ul 酶I

1ul 酶II

3ul 10* buffer

ddH2O 补足

这个体积算是适中吧,做回收的话胶倒厚一点一个孔就装下了。

体系也不至于小到PCR产物或DAN中的杂七乱八的东西抑制酶切。
2楼2011-03-01 17:48:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wanghuiyanyx

金虫 (著名写手)



rainwander(金币+1): 鼓励参与交流~~~ 2011-03-01 22:39:33
xiaoyu1014126(金币+1): 2011-03-02 11:53:26
看你需要切什么东东啊,以及后续是干嘛用的,如果是验证质粒,20就够了,有时候用10微升的都没问题。但是要是切基因组的话,一般要用大体系(不少于50),而且基因组最好用黄枪尖(200微升)吸取。
3楼2011-03-01 21:40:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rainwander

铁杆木虫 (知名作家)


xiaoyu1014126(金币+1): 2011-03-02 11:53:47
20-100微升的酶切体系都做过,

酶的量0.5-2微升也试过
4楼2011-03-01 22:40:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +9 家与远方 2026-08-10 14/700 2026-08-13 09:41 by 臭臭不臭01
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +22 Lanmanbaby 2026-08-09 36/1800 2026-08-12 22:50 by sdfapple719
[基金申请] filecode +13 documentary 2026-08-10 15/750 2026-08-12 15:56 by 云上清扬
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分? +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[硕博家园] 读博的好处 +3 lnee 2026-08-11 3/150 2026-08-11 18:10 by 希望我好好的
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 听说今天filecode变了 +26 布布和一二 2026-08-06 49/2450 2026-08-11 13:18 by WH3796
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 关于代码变化问题,想知道的进来 +17 且听虎啸 2026-08-07 24/1200 2026-08-10 18:35 by zhangduo2008
[基金申请] 静等基金结果 +5 gjjjzhong 2026-08-10 16/800 2026-08-10 17:19 by Tide man
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +9 布布和一二 2026-08-08 9/450 2026-08-10 11:22 by xxxx2020
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +11 布布和一二 2026-08-08 22/1100 2026-08-10 11:10 by wmfsnow
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +5 布布和一二 2026-08-07 5/250 2026-08-09 16:15 by 袁向阳007
[基金申请] 国基金的申报应该改成非等额制,评价高的钱多评价低的钱少,但是增加资助率 +7 a089 2026-08-07 7/350 2026-08-08 18:05 by gltch
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] filecode +14 等待解的谜 2026-08-06 19/950 2026-08-07 12:20 by wlwhappy
信息提示
请填处理意见