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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 【求助/交流】组氨酸标记的蛋白表达活性问题
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tutufei

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】组氨酸标记的蛋白表达活性问题

我的蛋白当没有组氨酸标记时的活性很好，而加上组氨酸标记后，活性稍减弱，纯化后的条带很粗且单一，但检测不到活性，我尝试了降低诱导温度，IPTG的量，效果都不理想，能不能帮我分析分析，该怎么优化呢
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1楼 2011-01-13 20:54:29
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darling1210

铜虫 (小有名气)
★ ★
dhd997(金币+2):good 2011-01-14 10:07:14
tutufei(金币+1): 谢谢 2011-01-21 21:57:42
楼主是否用不加IPTG诱导的，或者空白载体做对照呢，会不会你表达宿主本身可以表达你所检测酶活方法的那种酶呢？
要不然，如果你确定，你所纯化的单一条带是你的目标条带的话，怎么可能一点酶活也没有呢！
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7楼2011-01-14 00:33:48
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darling1210

铜虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by darling1210 at 2011-01-14 00:33:48:
楼主是否用不加IPTG诱导的，或者空白载体做对照呢，会不会你表达宿主本身可以表达你所检测酶活方法的那种酶呢？
要不然，如果你确定，你所纯化的单一条带是你的目标条带的话，怎么可能一点酶活也没有呢！

求真相：LZ的问题解决了吗？
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13楼2011-01-22 10:55:54
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