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zhh8672

木虫 (小有名气)

[交流] 【讨论】阴离子交换柱 多糖 已有2人参与

前几天试着用DEAE52纤维素柱来分离有颜色的多糖,根据相关文献,分别用水和不同浓度的氯化钠溶液作为流动相分阶段洗脱,发现多糖都洗脱不下来,后来分别用PBS和氢氧化钠来冲洗柱子,都不行,不知道什么原因?是不是多糖颜色太深,吸附力太强而不能洗脱呢?这种情况下又该如何处理这些填料啊,有没有一种离子强度很强的溶液适合于这种柱子的洗脱?困惑中,急求高人指点。

[ Last edited by lovibond on 2011-8-27 at 13:51 ]
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zhh8672

木虫 (小有名气)

怎么就没人说说呢?
2楼2010-11-01 15:35:23
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zdh0824

铁虫 (初入文坛)


zhh8672(金币+1):谢谢参与
引用回帖:
Originally posted by zhh8672 at 2010-10-27 18:49:33:
前几天试着用DEAE52纤维素柱来分离有颜色的多糖,根据相关文献,分别用水和不同浓度的氯化钠溶液作为流动相分阶段洗脱,发现多糖都洗脱不下来,后来分别用PBS和氢氧化钠来冲洗柱子,都不行,不知道什么原因?是不 ...

我也是多多糖纯化的,过柱子也总是出问题,你用的溶液浓度怎么样呢?不行就先把多糖脱色处理下看看。
3楼2011-03-01 22:28:01
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ockeyze

铜虫 (小有名气)

★ ★
zhh8672(金币+1):谢谢参与
junwen6516(金币+1): 感谢交流 2011-03-03 17:54:51
多糖为大分子,应该用大孔吸附树脂来吸附,我所知道的好像都是用大孔吸附树脂来吸附的,离子型存在的物质才用离子交换树脂,不知道我理解的对不?
4楼2011-03-01 23:02:25
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天冬酰胺

至尊木虫 (著名写手)

★ ★
zhh8672(金币+1):谢谢参与
junwen6516(金币+1): 感谢交流 2011-03-03 17:55:05
DEAE在多糖的纯化过程中是一类很长用到的离子交换树脂,一般用于中性糖和酸性糖的分离,水洗脱可获得中性糖,盐溶液洗脱可获得酸性糖。
你的粗品糖含量有多少,是不是因为你糖含量本身就低,上样量不够啊,所以拿不到糖啊,用盐洗脱的时候可以用0-2M的盐溶液进行梯度洗脱。
5楼2011-03-03 16:07:51
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zhh8672(金币+1):谢谢参与
6楼2011-03-05 12:33:03
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gsli1987

木虫 (正式写手)


zhh8672(金币+1):谢谢参与
颜色很深,应该不是多糖引起的,而是色素造成的,上样前应先脱色就好了,糖的组分应该已经洗脱出来了,你没有用在线检测什么的么?
每个人都生来孤独
7楼2011-03-06 08:18:14
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violet006

禁虫 (小有名气)


zhh8672(金币+1):谢谢参与
本帖内容被屏蔽

8楼2011-03-06 10:59:30
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zhh8672

木虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by violet006 at 2011-03-06 10:59:30:
可以用稀酸和稀碱来回处理填料,注意每次换溶液前应先中和

嗯,这个在预处理过程中已经处理过了,效果并不是很好,有可能是填料已经坏了,因为是之前一个师姐用过的,放置了比较长一段时间。
9楼2011-03-07 09:04:52
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violet006

禁虫 (小有名气)

本帖内容被屏蔽

10楼2011-03-08 21:48:20
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