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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 碳水化合物 » DEAE-52洗脱液离子强度与产物之间的关系
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lowerscindy

新虫 (小有名气)

[求助] DEAE-52洗脱液离子强度与产物之间的关系

本人做的是天然产物方向，研究的多糖，现在用DEAE-52对多糖进行分离纯化，采用了梯度NaCl溶液进行洗脱，得到了2个产物，现在想问下各位大侠：洗脱液离子强度与产物有什么关系吗？吗？

先谢过了！
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1楼 2012-11-05 11:02:01
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lezai945

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
hsd3521: 应助指数+1 2012-11-14 21:52:51
lowerscindy: 金币+5, ★★★很有帮助 2012-11-15 18:32:34
DEAE-52是纤维素离子交换柱，他的分离原理是根据物质的不同离子强度来分离的。多糖，你可以认为是带负电荷的离子（实际上部分多糖确实是这样的，水中会电离出H离子），在上柱之后，多糖和DEAE因为离子作用而彼此吸附，其他的杂志要么就被冲洗下去了，要么就是也是因为是离子态而同样吸附在柱子上。所以，刚开始用去离子水洗脱下来的多糖，你可以认为是中性多糖。接下来就是用NaCl溶液洗脱了。加入了NaCl，就相当于加入反离子Cl，这个反离子就会跟吸附在柱子上的多糖离子竞争，多糖离子因为竞争不过，而被洗脱下来。但是为什么要用不同浓度的NaCl溶液，那是因为，离子强度适合NaCl溶液的浓度成正比的。用梯度洗脱的好处就是可以把多糖离子按离子强度由低到高，依次洗脱下来，而达到分离的目的。不知道你懂了没？祝你实验愉快。
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2楼2012-11-14 16:10:53
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lowerscindy

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lezai945 at 2012-11-14 16:10:53
DEAE-52是纤维素离子交换柱，他的分离原理是根据物质的不同离子强度来分离的。多糖，你可以认为是带负电荷的离子（实际上部分多糖确实是这样的，水中会电离出H离子），在上柱之后，多糖和DEAE因为离子作用而彼此吸附 ...

您看，我理解的意思是，随着NaCl浓度的提高（即竞争的力气强度提高），洗脱下来的糖的离子强度也一次增高。也就是用DEAE-52分离出来的是按多糖的离子强度进行分离纯化。您看我理解的对么？O(∩_∩)O谢谢
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3楼2012-11-14 20:03:02
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lezai945

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

hsd3521: 应助指数+1 2012-11-16 20:12:59
你理解的是对的，DEAE-52是离子交换柱，而且是阴离子交换柱。他是按照离子强度来分离纯化的，而且是由弱到强依次洗脱出来。也如：葡聚糖填料柱，他就是按照粒子（注意是粒子，不是离子）直径大小来分离纯化的，大孔树脂则是根据吸附力的大小来分离纯化的。而且这都属于液相色谱的范畴。你可以看看《仪器分析》这本书，有很详细的介绍。看懂这本书，你会懂得很多东西的。
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4楼2012-11-15 08:37:48
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lowerscindy

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by lezai945 at 2012-11-15 08:37:48
你理解的是对的，DEAE-52是离子交换柱，而且是阴离子交换柱。他是按照离子强度来分离纯化的，而且是由弱到强依次洗脱出来。也如：葡聚糖填料柱，他就是按照粒子（注意是粒子，不是离子）直径大小来分离纯化的，大孔 ...

谢谢，金币马上送上哦
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5楼2012-11-15 18:32:19
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只差一步

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lezai945 at 2012-11-14 16:10:53
DEAE-52是纤维素离子交换柱，他的分离原理是根据物质的不同离子强度来分离的。多糖，你可以认为是带负电荷的离子（实际上部分多糖确实是这样的，水中会电离出H离子），在上柱之后，多糖和DEAE因为离子作用而彼此吸附 ...

您好，我想请教您两个问题，目前实验室有争议：1.过柱子分离多糖时，上个组分和下个组分之间保存在柱子里的那部分的洗脱液大家的实验室是归到哪个组分里的？
2.比如我想要的多糖是在0.3 mol/L的 NaCl（实验完整流程是0-1mol/L）这个组分，那我下次做的时候可不可以直接上0.3 mol/L的 NaCl洗脱液，忽略前边的水、0.1、0.2这些组分。0-0.2部分的会不会一起被洗脱至0.3的组分里呢？

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6楼2019-08-21 11:39:54
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