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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » DEAE-52柱洗脱多糖后的吸光度问题
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黄俊彬

银虫 (初入文坛)

[求助] DEAE-52柱洗脱多糖后的吸光度问题 已有2人参与

本人用DEAE-52阴离子交换树脂柱来纯化粗多糖，用水洗脱，接样后用苯酚硫酸法测试吸光度合并洗脱液再浓缩，上样量为300mg每10mL，但是测试完后的吸收曲线为梯形，且吸光度都很低，如图所示，看过的文献都是尖峰那种的，而上样量都是之前实验室师兄摸过的，虽然峰型和数据差好多，但是有吸收的部分确实和师兄之前的基本重叠，难道真的是过载了？还是哪里有什么问题了？求大神指点一下。。。

DEAE-52柱洗脱多糖后的吸光度问题
图片1.png
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1楼 2015-05-08 11:12:15
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小小木chong

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

很明显，你的糖没有分很开，你的洗脱液只是单纯的用蒸馏水吗？可以尝试使用不同离子浓度的盐洗脱，看看效果会不会好些。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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2楼2015-09-10 14:58:37
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wo1656478

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

你样品（梯形上边部分）浓度太大，超过了“检测限”。你把吸光度超过0.2的那些样品稀释后再测量，直到吸光度小于0.2。
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3楼2016-10-28 22:15:15
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开元天宝

银虫 (初入文坛)
同问，还想求助一下，测吸光度的时候取多少测呀，我想用蒽酮硫酸法，加多少蒽酮硫酸呢
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4楼2019-06-28 11:38:18
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