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DEAE-52柱洗脱多糖后的吸光度问题
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黄俊彬
银虫
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注册: 2014-09-13
性别: GG
专业: 中药制剂
[
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]
DEAE-52柱洗脱多糖后的吸光度问题
已有2人参与
本人用DEAE-52阴离子交换树脂柱来纯化粗多糖,用水洗脱,接样后用苯酚硫酸法测试吸光度合并洗脱液再浓缩,上样量为300mg每10mL,但是测试完后的吸收曲线为梯形,且吸光度都很低,如图所示,看过的文献都是尖峰那种的,而上样量都是之前实验室师兄摸过的,虽然峰型和数据差好多,但是有吸收的部分确实和师兄之前的基本重叠,难道真的是过载了?还是哪里有什么问题了?求大神指点一下。。。
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1楼
2015-05-08 11:12:15
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小小木chong
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【答案】应助回帖
很明显,你的糖没有分很开,你的洗脱液只是单纯的用蒸馏水吗?可以尝试使用不同离子浓度的盐洗脱,看看效果会不会好些。
[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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2楼
2015-09-10 14:58:37
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wo1656478
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虫号: 5053438
注册: 2016-09-24
专业: 中兽医学
【答案】应助回帖
你样品(梯形上边部分)浓度太大,超过了“检测限”。你把吸光度超过0.2的那些样品稀释后再测量,直到吸光度小于0.2。
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3楼
2016-10-28 22:15:15
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开元天宝
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虫号: 13788317
注册: 2019-01-10
专业: 中药炮制
同问,还想求助一下,测吸光度的时候取多少测呀,我想用蒽酮硫酸法,加多少蒽酮硫酸呢
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4楼
2019-06-28 11:38:18
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