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feixieliuli

铜虫 (小有名气)

[求助] DEAE-纤维素-A52弱阴离子交换柱

我 上样量是2ml,柱子高55cm,直径1.2cm,用的是NaCl0-0.6梯度洗脱,第一个图是缩小的,第二个图是放大的,第三个是别人的文献里的图。我的吸光度都超过1了,怎么办,正常吗?图上那么多峰,是目的蛋白吗?文献里是第一个峰是目的蛋白
DEAE-纤维素-A52弱阴离子交换柱
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DEAE-纤维素-A52弱阴离子交换柱-1
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不念过去,不畏将来
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zxldai

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
feixieliuli(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,感谢你的慷慨解囊,期待你的精彩。 2013-05-27 08:33:45
有可能是流速太快,导致组分没有完全分开。你改变一下流速试试。也可能是洗脱液的梯度不合适,总之,自己多试一试,不一定与文献报道相同,找到适合自己实验的条件即可。
2楼2013-05-24 08:18:48
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feixieliuli

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zxldai at 2013-05-24 08:18:48
有可能是流速太快,导致组分没有完全分开。你改变一下流速试试。也可能是洗脱液的梯度不合适,总之,自己多试一试,不一定与文献报道相同,找到适合自己实验的条件即可。

我的样品颜色很深的,柱子上吸附很多色素。我想问一下色素会洗下来吗?我的第一个峰有可能是色素峰吗?
不念过去,不畏将来
3楼2013-05-25 14:22:19
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zxldai

木虫 (正式写手)


feixieliuli(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,感谢你的慷慨解囊,期待你的精彩。 2013-05-27 08:33:58
第一峰是不是你的组分,你采用检测组分的方法测定一下不就晓得了。色素可以部分去除,既然颜色很深,是不是可以考虑先脱色,然后再分离组分?
4楼2013-05-26 19:46:32
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