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feixieliuli

铜虫 (小有名气)

[求助] DEAE-纤维素-A52弱阴离子交换柱

我 上样量是2ml，柱子高55cm，直径1.2cm，用的是NaCl0-0.6梯度洗脱，第一个图是缩小的，第二个图是放大的，第三个是别人的文献里的图。我的吸光度都超过1了，怎么办，正常吗？图上那么多峰，是目的蛋白吗？文献里是第一个峰是目的蛋白
DEAE-纤维素-A52弱阴离子交换柱
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DEAE-纤维素-A52弱阴离子交换柱-1
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不念过去，不畏将来
1楼 2013-05-23 21:18:52
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zxldai

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
feixieliuli(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，感谢你的慷慨解囊，期待你的精彩。 2013-05-27 08:33:45
有可能是流速太快，导致组分没有完全分开。你改变一下流速试试。也可能是洗脱液的梯度不合适，总之，自己多试一试，不一定与文献报道相同，找到适合自己实验的条件即可。
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2楼2013-05-24 08:18:48
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feixieliuli

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zxldai at 2013-05-24 08:18:48
有可能是流速太快，导致组分没有完全分开。你改变一下流速试试。也可能是洗脱液的梯度不合适，总之，自己多试一试，不一定与文献报道相同，找到适合自己实验的条件即可。

我的样品颜色很深的，柱子上吸附很多色素。我想问一下色素会洗下来吗？我的第一个峰有可能是色素峰吗？
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不念过去，不畏将来
3楼2013-05-25 14:22:19
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zxldai

木虫 (正式写手)
★
feixieliuli(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，感谢你的慷慨解囊，期待你的精彩。 2013-05-27 08:33:58
第一峰是不是你的组分，你采用检测组分的方法测定一下不就晓得了。色素可以部分去除，既然颜色很深，是不是可以考虑先脱色，然后再分离组分？
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4楼2013-05-26 19:46:32
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