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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 天然药物化学 » DEAE-纤维素分离多糖时若盐浓度高于糖能否通过稀释来富集多糖？
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杨文心

木虫 (小有名气)

[交流] DEAE-纤维素分离多糖时若盐浓度高于糖能否通过稀释来富集多糖？ 已有5人参与

请问我用DEAE-纤维素柱层析来分离多糖，若样液中盐浓度过高则多糖很难吸附，或者边吸附边洗脱下来，效果肯定不好的。那么我如果将样液稀释很多倍，使其中盐浓度降下来再过柱，这样能富集到我的多糖么？担心稀释样液的同时糖含量也同样稀释了，因为糖和盐（Cl-）是竞争吸附的，原本样液中盐浓度就比糖浓度高，稀释后尽管浓度都下降了，但盐的浓度应该还是会比糖浓度高的，这样过DEAE柱能只吸附糖而不吸附盐么？求赐教！！！
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1楼 2012-04-10 10:31:40
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豆哥

主管区长 (职业作家)

制粒能手

优秀版主优秀版主
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2012-04-10 17:52:09
怎么不先脱盐呢？透析一下。
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边学边问，才有学问。
2楼2012-04-10 11:23:15
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lihuan0525

金虫 (职业作家)
★
leecius: 金币+1, 谢谢！ 2012-04-11 08:52:46
我觉得也是先脱盐，
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3楼2012-04-10 14:48:41
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杨文心

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 豆哥 at 2012-04-10 11:23:15:
怎么不先脱盐呢？透析一下。

我要的目标二糖分子量太小了，只有340左右，透析不太可行的，想过过凝胶柱除盐，但因为我是合成反应制备的糖，反应液会比较大，浓缩后再过柱依然会很大量的。就是不知道DEAE能不能达到这个效果呢？
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4楼2012-04-10 16:56:51
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杨文心

木虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by lihuan0525 at 2012-04-10 14:48:41:
我觉得也是先脱盐，

我要的目标二糖分子量太小了，只有340左右，透析不太可行的，想过过凝胶柱除盐，但因为我是合成反应制备的糖，反应液会比较大，浓缩后再过柱依然会很大量的。就是不知道DEAE能不能达到这个效果呢？
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5楼2012-04-10 16:57:09
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lihuan0525

金虫 (职业作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by 杨文心 at 2012-04-10 16:57:09:
我要的目标二糖分子量太小了，只有340左右，透析不太可行的，想过过凝胶柱除盐，但因为我是合成反应制备的糖，反应液会比较大，浓缩后再过柱依然会很大量的。就是不知道DEAE能不能达到这个效果呢？

一般纯化蛋白的话，仅仅靠一根柱子是不行的，除非是用亲和层析，打不分还是要用3根以上的。
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6楼2012-04-10 22:38:41
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杨文心

木虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by lihuan0525 at 2012-04-10 22:38:41:
一般纯化蛋白的话，仅仅靠一根柱子是不行的，除非是用亲和层析，打不分还是要用3根以上的。

打算先DEAE柱粗分一下，再用Sephadex G25细分，不过反应液盐太多了，除盐方法还得摸索一下。
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7楼2012-04-11 10:20:25
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mssj300130

铜虫 (小有名气)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
karl2100: 金币+1, 谢谢回帖！ 2012-04-12 00:33:33
你为什么不先看看直接上样，流穿的二糖回收率是多少，如果比较高的话不就解决了吗，前后平行测个浓度看看；如果你的反应做的很好，应该副产物不多吧，如果回收率比较低的话再尝试稀释，反正只需要取一部分就可以了小试就行了，这么小的糖还真没挂过离子；另外如果你只有Cl的话能不能调调pH，然后蒸干了呢，应该也能试一下
你想用G-25除盐的话可以尝试，主要看你340的糖能不能在内水之前出了，好像G-25是1-5K吧，如果是去除单糖的话估计希望不大
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8楼2012-04-11 12:37:15
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杨文心

木虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by mssj300130 at 2012-04-11 12:37:15:
你为什么不先看看直接上样，流穿的二糖回收率是多少，如果比较高的话不就解决了吗，前后平行测个浓度看看；如果你的反应做的很好，应该副产物不多吧，如果回收率比较低的话再尝试稀释，反正只需要取一部分就可以了 ...

我的反应液可能比较杂，大部分是盐类。原本希望过葡聚糖凝胶把副产物除掉的，但是因为量太大了，比较麻烦。你的建议不错，可以试试看下。另外，G25对球蛋白分离范围是1000-5000，但是对于线性葡聚糖，分离范围是可达到100-5000的。
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9楼2012-04-11 22:13:28
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gsli1987

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
可以试一下用丙酮沉淀脱盐
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每个人都生来孤独
10楼2012-04-12 18:28:11
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