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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 求助：细菌浓度的测量
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explore2010

金虫 (小有名气)

[求助] 求助：细菌浓度的测量

请问有谁知道用浊度仪怎么测量细菌浓度，我要用一定浓度的菌悬液做实验，可是总把握不好，用浊度仪测量的结果也不稳定，以致于实验总是失败，不知道是不是自己操作有问题......

[ Last edited by explore2010 on 2012-3-21 at 21:48 ]
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1楼 2012-03-21 21:34:34
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explore2010

金虫 (小有名气)
引用回帖:
18楼: Originally posted by zdwxxw at 2012-03-27 21:02:36:
流体细胞仪一步到位，没条件的话就稀释涂布、OD结合测标曲，之后测OD就好了

可我的浊度仪读出来的是麦氏单位，不是OD值，我是做杀/抑菌试验的，需要一定浓度的菌悬液，我想知道用我这个型号的浊度仪怎么才能得到稳定的数据，我每次测出来的与平板计数结果比较后，都没什么规律性
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19楼2012-03-27 21:18:52
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explore2010

金虫 (小有名气)
引用回帖:
20楼: Originally posted by zdwxxw at 2012-03-27 21:36:28:
我觉得你可以试试这样，菌悬液培养到一定程度后，做几个稀释梯度，涂布的同时，测一下这几个梯度的浊度，看一下有没有什么规律。其实我想问，你们实验室没有分光光度计吗？这个应该不贵呀，2W吧

这个浊度仪就是为了测浓度专门买的，刚买不到两个月，挺贵的7000块，结果还用着不顺手，我现在也只能是多做几次再再规律了
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21楼2012-03-27 22:24:58
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mingning

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
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rainwander: 金币+1, 鼓励交流 2012-03-23 08:37:38
1. OD600纳米处，稀释培养液，保证其吸光度值保持在0.2-1之间，这样误差比较小；2.干重法做参考，培养液调节pH到7，离心，无菌水洗涤两次，称量离心后干重，可做参考。
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别人笑我太淫荡，我笑他人不开放
6楼2012-03-23 08:25:04
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wjf008

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
zhang8826857: 金币+1, 继续努力哦^_^ 2012-03-27 22:19:10
果断放弃OD测量，国外的论文精确计数都是干重或者是活菌计数。其他方法都只能确定大概趋势的。
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8楼2012-03-23 14:05:11
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scienceybj

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
rainwander: 金币+1, 鼓励交流 2012-03-22 09:49:32
explore2010: 金币+1, ★有帮助 2012-03-26 21:24:45
可以测OD值，我们实验室都是这么做的。
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送人玫瑰，手有余香。
2楼2012-03-21 22:42:24
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feierorange

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
俺们一般情况下也是测OD值来的！
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3楼2012-03-22 09:32:41
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钻石大耳钉

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
rainwander: 金币+1, 鼓励交流 2012-03-22 16:43:41
发酵液先稀释到适当的倍数，然后测定OD600。之前别忘先做标准曲线
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一只热爱生活的纱布
4楼2012-03-22 10:27:47
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sxxuan

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
rainwander: 金币+1, 鼓励交流 2012-03-22 16:43:49
测OD600，把菌液稀释到OD值1以内，否则数值不太准确。
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你的日子如何，你的力量也必如何！
5楼2012-03-22 15:50:08
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zcc3255

木虫 (正式写手)

熊猫

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
zhang8826857: 金币+1, 继续努力哦^_^ 2012-03-27 22:19:29
对啊，都是测OD600，你浊度仪的原理也是测OD值吧，可能仪器不准确了
换个仪器试试，菌液稀释
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7楼2012-03-23 09:40:32
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xiejinhui

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 钻石大耳钉 at 2012-03-22 10:27:47:
发酵液先稀释到适当的倍数，然后测定OD600。之前别忘先做标准曲线

你做曲线时用什么做的标准品啊。
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9楼2012-03-23 14:12:56
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necilyx

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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有条件流失细胞仪可以菌体计数。
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聪明才智要为意外做准备~~
10楼2012-03-23 20:40:24
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痴客

木虫 (正式写手)

吃货250

【答案】应助回帖

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普通实验，测OD600就足够了
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因为这个世界上这么多的狼，我这只牧羊犬只好放弃我的温顺，向着这个世界放出最耀眼的光。
12楼2012-03-23 23:55:38
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夏维依

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
zhang8826857: 金币+1, 继续努力哦^_^ 2012-03-27 22:20:47
我也觉得OD值不可靠，还是稀释后平板计数
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每一天都是一个新的起点，希望同大阳一起升起
13楼2012-03-24 12:59:29
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dreamshaker

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
流式细胞仪，的有条件啊
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踏踏实实，体会科研的乐趣
14楼2012-03-25 00:25:09
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骑猪看日出

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
zhang8826857: 金币+1, 继续努力哦^_^ 2012-03-27 22:19:59
OD值得到的是趋势，死菌活菌分不开，涂板计数比较准确就是操作稍微麻烦点。
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15楼2012-03-25 08:52:21
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vszhang

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
zhang8826857: 金币+1, 继续努力哦^_^ 2012-03-27 22:19:36
第一次操作时，用平板记数法是最准确的，和OD法相结合，作出曲线，以后对某个特定的细菌选用合适的OD就可以了。。
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启蒙的恩师是‘神拳泰斗’刘虎刘老爷子，然后是‘无敌刀’杨斌杨二爷子、‘一枪刺九龙’赵广赵老师、‘神刀铁胳臂’胡得杨胡大爷
16楼2012-03-25 11:06:33
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