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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 【求助/交流】细菌中酶活的测定用紫外可见分光光度法怎么测？
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生物00

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】细菌中酶活的测定用紫外可见分光光度法怎么测？ 已有4人参与

我打算测细菌中ACC脱氨酶的酶活，酶活的测定方法是通过甲苯破壁再经过一系列的反应后用2，4-二硝基苯肼染色，再测量OD值。之后得出的这个OD值怎么还原成酶活单位一直在困扰着我，哪位高人懂的帮忙指点下，谢谢。
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1楼 2010-07-20 11:33:58
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看天

木虫 (知名作家)
★
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引用回帖:
Originally posted by 生物00 at 2010-07-20 11:33:58:
我打算测细菌中ACC脱氨酶的酶活，酶活的测定方法是通过甲苯破壁再经过一系列的反应后用2，4-二硝基苯肼染色，再测量OD值。之后得出的这个OD值怎么还原成酶活单位一直在困扰着我，哪位高人懂的帮忙指点下，谢谢。

你要做染色后那种物质吸光值的标准曲线 以找出OD与浓度的关系 进而计算酶活
要么你就是在标准的比色皿中测定 查找一下这种有色物质的吸光系数 吧OD换算成浓度
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戒嗔怒以养肝气，省言语以养神气，多读书以养质气，顺时令以养元气，不拘节以养大气，观天变以养灵气，莫强求规于运气。
2楼2010-07-20 12:12:25
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shenlin0514

木虫 (正式写手)

无名小虫
查询国外已有文献，按照文章中的enzyme assay中的方法测定再进行换算
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Never say never
3楼2010-07-20 15:06:09
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lwiaanngg

铁杆木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
两种方法：
1 用有颜色的产物做标准曲线，然后根据标准曲线算出反应的速率
2 你只要能查到产物的extinction coefficient，就可以直接使用这个和OD的关系进行计算
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4楼2010-07-20 16:04:11
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达一木

铜虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
不知道这个方法的准确度能达到多少？
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5楼2010-07-20 17:01:22
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