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生物00

新虫 (初入文坛)

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[交流] 【求助/交流】细菌中酶活的测定用紫外可见分光光度法怎么测？已有4人参与

我打算测细菌中ACC脱氨酶的酶活，酶活的测定方法是通过甲苯破壁再经过一系列的反应后用2，4-二硝基苯肼染色，再测量OD值。之后得出的这个OD值怎么还原成酶活单位一直在困扰着我，哪位高人懂的帮忙指点下，谢谢。

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1楼2010-07-20 11:33:58

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lwiaanngg

铁杆木虫 (著名写手)

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两种方法：
1 用有颜色的产物做标准曲线，然后根据标准曲线算出反应的速率
2 你只要能查到产物的extinction coefficient，就可以直接使用这个和OD的关系进行计算

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4楼2010-07-20 16:04:11

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看天

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引用回帖:

Originally posted by 生物00 at 2010-07-20 11:33:58:
我打算测细菌中ACC脱氨酶的酶活，酶活的测定方法是通过甲苯破壁再经过一系列的反应后用2，4-二硝基苯肼染色，再测量OD值。之后得出的这个OD值怎么还原成酶活单位一直在困扰着我，哪位高人懂的帮忙指点下，谢谢。

你要做染色后那种物质吸光值的标准曲线以找出OD与浓度的关系进而计算酶活
要么你就是在标准的比色皿中测定查找一下这种有色物质的吸光系数吧OD换算成浓度

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戒嗔怒以养肝气，省言语以养神气，多读书以养质气，顺时令以养元气，不拘节以养大气，观天变以养灵气，莫强求规于运气。