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daoqi1989

新虫 (初入文坛)

[求助] DEAE-纤维素的预处理方式 已有2人参与

我的DEAE纤维素是这种类型的   请教各位这种纤维素的处理方式跟现在很多商品型的预溶胀颗粒处理方式一样么?我取一定量溶于水中观察,过夜,发现基本不溶胀。急求,大家给给意见!

DEAE 纤维素
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feixieliuli

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

最近我也在做这个,这个应该是不会润涨的,我实验室买的是国产的,也不会膨胀,我们是这样处理的
称取70g DEAE-纤维素52
↓
将柱料倾洒在7000mL(100倍体积)蒸馏水中
↓
搅拌均匀后静止放置1h
↓
去掉上层漂浮细粒
↓
抽滤将柱料抽干(两层滤纸)
↓
使用1050mL(15倍体积) NaOH浸泡30min
↓
倒去上层并抽干
↓
水洗至滤液呈中性
↓
使用1050mL(15倍体积) HCl浸泡30min
↓
倒去上层并抽干
↓
水洗至滤液呈中性
↓
使用1050mL(15倍体积) NaOH浸泡30min
↓
倒去上层并抽干
↓
水洗至滤液呈中性
,填料的时候首先在柱子中加入三分之的水或者是缓冲溶液,然后把柱料调成糊状(大概是1:1或者再稀一点),这样上柱没有气泡,我们已经试过了
不念过去,不畏将来
5楼2013-05-25 16:08:29
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lezai945

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

hsd3521: 应助指数+1 2012-11-16 20:56:55
DEAE-52纤维素不会像葡聚糖凝胶那样,他的溶胀系数不高,更不会溶解,只会沉淀下去,分层很清晰,这是正常的。你装柱子的时候,只需要用玻璃棒把溶液搅拌成均匀,有点像浆糊,然后迅速的一次性灌进柱子里,一定要是一次性的,然后把柱口残留的白色填料用少量水(可以用移液枪)把它冲下去,然后再轻轻弹几下柱子,静置一晚就可以用了。
过柱子一定要有耐心,操作也要细心。不然是很难分离出高纯度的纯品的。
祝你实验愉快。
2楼2012-11-16 10:55:58
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glsw1224

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by feixieliuli at 2013-05-25 16:08:29
最近我也在做这个,这个应该是不会润涨的,我实验室买的是国产的,也不会膨胀,我们是这样处理的
称取70g DEAE-纤维素52
↓
将柱料倾洒在7000mL(100倍体积)蒸馏水中
↓
搅拌均匀后静止放置1h
↓
去掉上层漂 ...

你好,想问下你选择的层析柱的规格是多大的,谢谢!
8楼2014-04-16 16:54:47
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普通回帖

木小虫280

金虫 (正式写手)

学习了,我也遇到过这个问题,后来直接装柱子了,分离效果还行
3楼2012-11-16 16:40:40
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daoqi1989

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by lezai945 at 2012-11-16 10:55:58
DEAE-52纤维素不会像葡聚糖凝胶那样,他的溶胀系数不高,更不会溶解,只会沉淀下去,分层很清晰,这是正常的。你装柱子的时候,只需要用玻璃棒把溶液搅拌成均匀,有点像浆糊,然后迅速的一次性灌进柱子里,一定要是 ...

谢谢!一次性灌注很多气泡啊,用的是国产纤维素填料,气泡老排不尽,试过超声、抽滤等,拍气泡都不理想,后来就是边装柱子边搅拌拍气泡,请问一般怎么处理排气泡的问题呢?
4楼2012-11-22 16:58:59
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cy201140153@

银虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by feixieliuli at 2013-05-25 16:08:29
最近我也在做这个,这个应该是不会润涨的,我实验室买的是国产的,也不会膨胀,我们是这样处理的
称取70g DEAE-纤维素52
↓
将柱料倾洒在7000mL(100倍体积)蒸馏水中
↓
搅拌均匀后静止放置1h
↓
去掉上层漂 ...

我想问一下,楼主使用的酸碱浓度是多少????
天行健,君子以自强不息地势坤,君子以厚德载物
6楼2013-11-23 10:14:27
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lxqshss

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by feixieliuli at 2013-05-25 16:08:29
最近我也在做这个,这个应该是不会润涨的,我实验室买的是国产的,也不会膨胀,我们是这样处理的
称取70g DEAE-纤维素52
↓
将柱料倾洒在7000mL(100倍体积)蒸馏水中
↓
搅拌均匀后静止放置1h
↓
去掉上层漂 ...

我想知道你是怎么做到抽干的?这边一层滤纸都抽不动。
7楼2014-02-17 18:41:22
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DNA22

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

水不溶胀,碱可以   我做的时候是这样
9楼2014-10-11 10:34:24
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elsa2005

木虫 (著名写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by feixieliuli at 2013-05-25 16:08:29
最近我也在做这个,这个应该是不会润涨的,我实验室买的是国产的,也不会膨胀,我们是这样处理的
称取70g DEAE-纤维素52
↓
将柱料倾洒在7000mL(100倍体积)蒸馏水中
↓
搅拌均匀后静止放置1h
↓
去掉上层漂 ...

同问柱子规格
10楼2014-10-30 16:51:00
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