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lowerscindy新虫 (小有名气)
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[求助]
DEAE-52洗脱液离子强度与产物之间的关系
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本人做的是天然产物方向，研究的多糖，现在用DEAE-52对多糖进行分离纯化，采用了梯度NaCl溶液进行洗脱，得到了2个产物，现在想问下各位大侠：洗脱液离子强度与产物有什么关系吗？吗？ 先谢过了！ |
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您好，我想请教您两个问题，目前实验室有争议：1.过柱子分离多糖时，上个组分和下个组分之间保存在柱子里的那部分的洗脱液大家的实验室是归到哪个组分里的？ 2.比如我想要的多糖是在0.3 mol/L的 NaCl（实验完整流程是0-1mol/L）这个组分，那我下次做的时候可不可以直接上0.3 mol/L的 NaCl洗脱液，忽略前边的水、0.1、0.2这些组分。0-0.2部分的会不会一起被洗脱至0.3的组分里呢？ 发自小木虫Android客户端 |
6楼2019-08-21 11:39:54
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★
hsd3521: 应助指数+1 2012-11-14 21:52:51
lowerscindy: 金币+5, ★★★很有帮助 2012-11-15 18:32:34
hsd3521: 应助指数+1 2012-11-14 21:52:51
lowerscindy: 金币+5, ★★★很有帮助 2012-11-15 18:32:34
| DEAE-52是纤维素离子交换柱，他的分离原理是根据物质的不同离子强度来分离的。多糖，你可以认为是带负电荷的离子（实际上部分多糖确实是这样的，水中会电离出H离子），在上柱之后，多糖和DEAE因为离子作用而彼此吸附，其他的杂志要么就被冲洗下去了，要么就是也是因为是离子态而同样吸附在柱子上。所以，刚开始用去离子水洗脱下来的多糖，你可以认为是中性多糖。接下来就是用NaCl溶液洗脱了。加入了NaCl，就相当于加入反离子Cl，这个反离子就会跟吸附在柱子上的多糖离子竞争，多糖离子因为竞争不过，而被洗脱下来。但是为什么要用不同浓度的NaCl溶液，那是因为，离子强度适合NaCl溶液的浓度成正比的。用梯度洗脱的好处就是可以把多糖离子按离子强度由低到高，依次洗脱下来，而达到分离的目的。不知道你懂了没？祝你实验愉快。 |
2楼2012-11-14 16:10:53
lowerscindy
新虫 (小有名气)
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3楼2012-11-14 20:03:02
4楼2012-11-15 08:37:48
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