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l219549z

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[求助] 为什么DEAE-52阴离子交换层析峰形又宽又扁?

我用DEAE 52(填料1.6cm*16cm)分离纯化粗蛋白(从菌种发酵液中提取),条件为:
上样量5mg/ml ,共4ml
平衡液:0.05M Tris-HCl,pH 7.5
梯度洗脱:500ml 1M NaCl 打入500ml 蒸馏水中
流速:1ml/min
上样后先用平衡液洗15管,然后再用盐洗脱
可是结果峰形不理想 ,30-100管峰又宽又扁,见下图。
恳求大家帮忙看一下,帮我找一下原因~~~~谢谢!
为什么DEAE-52阴离子交换层析峰形又宽又扁?
图片2.jpg
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