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lowerscindy

新虫 (小有名气)

[求助] DEAE-52洗脱液离子强度与产物之间的关系

本人做的是天然产物方向,研究的多糖,现在用DEAE-52对多糖进行分离纯化,采用了梯度NaCl溶液进行洗脱,得到了2个产物,现在想问下各位大侠:洗脱液离子强度与产物有什么关系吗?吗?

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lezai945

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

hsd3521: 应助指数+1 2012-11-16 20:12:59
你理解的是对的,DEAE-52是离子交换柱,而且是阴离子交换柱。他是按照离子强度来分离纯化的,而且是由弱到强依次洗脱出来。也如:葡聚糖填料柱,他就是按照粒子(注意是粒子,不是离子)直径大小来分离纯化的,大孔树脂则是根据吸附力的大小来分离纯化的。而且这都属于液相色谱的范畴。你可以看看《仪器分析》这本书,有很详细的介绍。看懂这本书,你会懂得很多东西的。
4楼2012-11-15 08:37:48
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lezai945

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
hsd3521: 应助指数+1 2012-11-14 21:52:51
lowerscindy: 金币+5, ★★★很有帮助 2012-11-15 18:32:34
DEAE-52是纤维素离子交换柱,他的分离原理是根据物质的不同离子强度来分离的。多糖,你可以认为是带负电荷的离子(实际上部分多糖确实是这样的,水中会电离出H离子),在上柱之后,多糖和DEAE因为离子作用而彼此吸附,其他的杂志要么就被冲洗下去了,要么就是也是因为是离子态而同样吸附在柱子上。所以,刚开始用去离子水洗脱下来的多糖,你可以认为是中性多糖。接下来就是用NaCl溶液洗脱了。加入了NaCl,就相当于加入反离子Cl,这个反离子就会跟吸附在柱子上的多糖离子竞争,多糖离子因为竞争不过,而被洗脱下来。但是为什么要用不同浓度的NaCl溶液,那是因为,离子强度适合NaCl溶液的浓度成正比的。用梯度洗脱的好处就是可以把多糖离子按离子强度由低到高,依次洗脱下来,而达到分离的目的。不知道你懂了没?祝你实验愉快。
2楼2012-11-14 16:10:53
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lowerscindy

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by lezai945 at 2012-11-14 16:10:53
DEAE-52是纤维素离子交换柱,他的分离原理是根据物质的不同离子强度来分离的。多糖,你可以认为是带负电荷的离子(实际上部分多糖确实是这样的,水中会电离出H离子),在上柱之后,多糖和DEAE因为离子作用而彼此吸附 ...

您看,我理解的意思是,随着NaCl浓度的提高(即竞争的力气强度提高),洗脱下来的糖的离子强度也一次增高。也就是用DEAE-52分离出来的是按多糖的离子强度进行分离纯化。您看我理解的对么?O(∩_∩)O谢谢
3楼2012-11-14 20:03:02
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lowerscindy

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by lezai945 at 2012-11-15 08:37:48
你理解的是对的,DEAE-52是离子交换柱,而且是阴离子交换柱。他是按照离子强度来分离纯化的,而且是由弱到强依次洗脱出来。也如:葡聚糖填料柱,他就是按照粒子(注意是粒子,不是离子)直径大小来分离纯化的,大孔 ...

谢谢,金币马上送上哦
5楼2012-11-15 18:32:19
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