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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 碳水化合物 » 多糖纯化关于DEAE
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da1234mao

铁虫 (著名写手)

[求助] 多糖纯化关于DEAE

最近在做多糖纯化，已经醇沉完毕，直接上了DEAE，发现大部分物质直接被洗脱下来了，虽然有部分被保留，但是量很少。按照DEAE的分离机理来说该树脂属于离子交换型树脂，本来应该有一定的吸附，如色素，蛋白，但是蛋白在纯水后峰很低，色素就基本没有吸附。请问这个是什么情况，我分离的是硫酸多糖，本想重复下他们的实验。但是结果不好啊。请各位大侠不吝赐教。
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1楼 2013-11-18 11:01:08
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hsd3521

主管区长 (知名作家)

火星驻地球联络处主任科员

优秀区长优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
da1234mao: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-11-18 13:41:42
我也遇到了这种情况 一般可能是填料非正品 或者你的样品浓度过载 或者有其它产物阻碍了目标物的吸附
一步纯化很难 所以多步是正常的
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太胖了！~
2楼2013-11-18 11:57:34
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lihuan0525

金虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

商家已经主动声明此回帖可能含有宣传内容
感谢参与，应助指数 +1
离子交换是有一定的载量的，是不是超出载量了。
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3楼2013-11-18 13:13:04
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zhenwuhuang

至尊木虫 (文学泰斗)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
www.paper.edu.cn/journal/downCou ... 3)02-0100-04‎
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4楼2013-11-18 13:40:01
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heyutang

铁虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
hsd3521: 金币-5, 应助指数-1, 请不要刷应助，直接copy别人的回复，谢谢，暂做处罚 2013-11-18 15:59:38
我也遇到了这种情况 一般可能是填料非正品 或者你的样品浓度过载 或者有其它产物阻碍了目标物的吸附
一步纯化很难 所以多步是正常的
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5楼2013-11-18 13:42:12
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da1234mao

铁虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by hsd3521 at 2013-11-18 11:57:34
我也遇到了这种情况 一般可能是填料非正品 或者你的样品浓度过载 或者有其它产物阻碍了目标物的吸附
一步纯化很难 所以多步是正常的

我大概是20ML的DEAE sepharose， 上了1mL,浓度大概为10mg/mL，我就眼看着样品被冲下来了，我觉着是不是要有个吸附时间呢
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6楼2013-11-18 13:43:32
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da1234mao

铁虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by zhenwuhuang at 2013-11-18 13:40:01
www.paper.edu.cn/journal/downCount/1002-0306(2013)02-0100-04‎

没有看到是什么？
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7楼2013-11-18 13:43:48
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da1234mao

铁虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by lihuan0525 at 2013-11-18 13:13:04
离子交换是有一定的载量的，是不是超出载量了。

不应该，
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8楼2013-11-18 13:44:01
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小李爱学习

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ...
感谢参与，应助指数 +1
da1234mao: 金币+20, ★★★很有帮助 2013-11-19 16:03:21
da1234mao: 金币+75, ★★★★★最佳答案 2013-11-19 18:32:09
DEAE是阴离子交换柱，你的样品很快洗脱下来，说明没有吸附上。你应该用缓冲液溶解样品并上样，提高一下缓冲液的pH有助于吸附。如果还是无法吸附则有可能你的多糖带正电荷，应该用阳离子交换柱纯化。正规的厂家出的填料应该没有问题。祝你试验成功。
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9楼2013-11-19 13:33:12
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673918771

金虫 (小有名气)
吸附树脂是选择性的吸附，针对实验中的色素不吸附，肯定是树脂的选型问题，树脂的型号不同，各项指标均不同，比如孔径，孔径过大，而色素分子过小，树脂当然吸附不上
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疲倦是可以战胜的，法宝就是珍爱我们自己。疲倦是可以化险为夷的，战术就是宁静致远。
10楼2013-11-26 10:44:05
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