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tianhang

新虫 (小有名气)

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[交流] 【求助/交流】质粒转不进农杆菌已有7人参与

已经做了几次农杆菌感受态了，可是还是转不进去质粒。每次涂完板都长的很少的菌落，鉴定后也没有目的带。有时候有目的带摇起来的菌液有没有目的带。好不容易菌液有条带，保种之后再摇就又没有了。太折磨人了！哪位大侠能帮帮小弟，感激不尽啊~有没有比较好农杆菌感受态制备方法，是发根农杆菌~
谢谢啦

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1楼2010-08-09 17:39:05

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tianhang

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引用回帖:

Originally posted by 周_yan at 2010-08-10 10:56:09:
我前段时间也遇到了同样的问题，总是筛不出带来，感觉总是转不进去；后来我又重新设计了一个引物与原来的不同的引物再筛就行了，发现前面筛的那些都是。可能的原因是转入农杆菌之后原来的引物序列丢失了或者有特殊 ...

那么说可能是引物的问题？引物在检测质粒的时候好用，但是由于质粒进入农杆菌后会产生变化？然后引物就不好用了么？请问你后来重新设计的引物与原来的有什么不同？需要在哪些地方改进？谢谢你的帮助哈~祝你试验成功~