24小时热门版块排行榜    

查看: 5414  |  回复: 13
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

tianhang

新虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】质粒转不进农杆菌 已有7人参与

已经做了几次农杆菌感受态了,可是还是转不进去质粒。每次涂完板都长的很少的菌落,鉴定后也没有目的带。有时候有目的带摇起来的菌液有没有目的带。好不容易菌液有条带,保种之后再摇就又没有了。太折磨人了!哪位大侠能帮帮小弟,感激不尽啊~有没有比较好农杆菌感受态制备方法,是发根农杆菌~
谢谢啦
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tianhang

新虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by 周_yan at 2010-08-10 10:56:09:
我前段时间也遇到了同样的问题,总是筛不出带来,感觉总是转不进去;后来我又重新设计了一个引物与原来的不同的引物再筛就行了,发现前面筛的那些都是。可能的原因是转入农杆菌之后原来的引物序列丢失了或者有特殊 ...

那么说可能是引物的问题?引物在检测质粒的时候好用,但是由于质粒进入农杆菌后会产生变化?然后引物就不好用了么?请问你后来重新设计的引物与原来的有什么不同?需要在哪些地方改进?谢谢你的帮助哈~祝你试验成功~
4楼2010-08-12 08:29:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答

chengao001

新虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
质粒丢失?我做转化时感觉挺好转的啊,平板上张得转化子少,但是基本上都是需要的。
2楼2010-08-09 20:31:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

周_yan

木虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我前段时间也遇到了同样的问题,总是筛不出带来,感觉总是转不进去;后来我又重新设计了一个引物与原来的不同的引物再筛就行了,发现前面筛的那些都是。可能的原因是转入农杆菌之后原来的引物序列丢失了或者有特殊结构使其不能配对。你可以试一试这个方法。
3楼2010-08-10 10:56:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tianhang

新虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by chengao001 at 2010-08-09 20:31:39:
质粒丢失?我做转化时感觉挺好转的啊,平板上张得转化子少,但是基本上都是需要的。

我觉得可能是感受态问题,涂在板上的转化的感受态细胞的菌体很多,但是都没有长出单菌落,好像是成片的死菌一样,偶尔长出来的单菌落鉴定确不是,但是把单菌落挑起来用抗生素培养液摇菌,4~7天后再检测却为阳性,但是继代重新摇又检测不到阳性条带了……
5楼2010-08-12 08:31:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 基金不中,共勉 +4 eulota 2026-08-26 4/200 2026-08-26 21:29 by 木风9012
[基金申请] 我不理解! +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +7 process2012 2026-08-23 10/500 2026-08-26 19:23 by hmhminy
[基金申请] 系统查不到 +10 董八千 2026-08-26 10/500 2026-08-26 16:30 by Equinoxhua
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +9 炎黄贵胄 2026-08-22 10/500 2026-08-26 15:40 by semaglutide
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件,有关系吗? +25 木水思豆 2026-08-25 28/1400 2026-08-26 14:53 by draco1987
[基金申请] 出来了 +9 trojank 2026-08-26 9/450 2026-08-26 14:25 by 宝贝虫子
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +26 yaoyewhu2008 2026-08-20 28/1400 2026-08-26 13:49 by zzuzxg
[基金申请] 哪位高人中了,把查询到的截图贴出来让我看看,让我长长见识 +4 yuleib84 2026-08-26 5/250 2026-08-26 13:40 by yuleib84
[基金申请] 科研孤儿太难了 +21 我4大白菜 2026-08-20 22/1100 2026-08-26 11:29 by nlgza
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +4 叶九微 2026-08-26 4/200 2026-08-26 10:52 by xiacongxu
[基金申请] 今天务委会开完了,明天出结果吗 +19 angus9576 2026-08-25 23/1150 2026-08-26 10:03 by zp519
[基金申请] 某些机构,以效率低为荣,以效率低作为存在感 +9 yuleib84 2026-08-25 10/500 2026-08-25 17:14 by alexon
[基金申请] 我面上完蛋了 +13 且听虎啸 2026-08-20 14/700 2026-08-25 09:10 by mrkang
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +13 kulium 2026-08-21 16/800 2026-08-24 16:27 by superceng
[基金申请] 让我中一个面上吧! +13 大萍1987 2026-08-20 16/800 2026-08-24 10:23 by 太傻了
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办? +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧? +4 哈哈蛤? 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
信息提示
请填处理意见