| 查看: 3495 | 回复: 7 | |||
[交流]
【求助/交流】我做转基因,如何把质粒转入农杆菌中?
|
|
自己有农杆菌菌株,向外单位要了基因.还是签了协议的. 别人给我们的基因应该是质粒形态的还是整合在大肠杆菌里的?应该不会是简单的双链DNA吧,我想的话. 如果是整合在大肠杆菌里的,我该怎么把基因弄到农杆菌中去? 如果是质粒形态的,我该怎么把基因弄到农杆菌里面去? 我需要技术路线,和注意事项.....谢谢....具体实验操作可以网上搜索. 谢谢. |
回复此楼» 猜你喜欢
2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战
已经有10人回复
-
有多少人是今天查系统知道结果的？
已经有16人回复
-
我不理解！
已经有14人回复
-
国自然面上复盘~欢迎讨论
已经有4人回复
-
系统查不到
已经有10人回复
-
基金不中，共勉
已经有3人回复
-
怎么查啊
已经有5人回复
-
范进中举一文的中心思想
已经有10人回复
-
2026国自然函评费到账
已经有25人回复
-
2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件，有关系吗？
已经有28人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 氯霉素抗性的质粒转入氯霉素抗性的宿主菌，请问如何鉴定是否成功转入！？
已经有9人回复
- 如何把质粒转入大肠杆菌中？
已经有13人回复
- 关于农杆菌单菌株/双质粒表达载体的构建问题
已经有14人回复
- 我的转基因啊。。都半年了。。求助过表达
已经有11人回复
- 农杆菌介导的水稻转基因农杆菌的选择问题
已经有24人回复
- 关于用农杆菌侵染法获得转基因植物的几点问题
已经有17人回复
- 质粒pCAMBIA1300转入农杆菌EHA105中的问题？
已经有7人回复
- 如何提取农杆菌质粒
已经有11人回复
- 【求助/交流】我是新手，请问T-DNA与RNAi的原理
已经有6人回复
- 【求助/交流】大肠杆菌，农杆菌质粒
已经有11人回复
- 【求助/交流】质粒转不进农杆菌
已经有13人回复
- 【求助/交流】急急急急！农杆菌培养温度超过30度，质粒就会丢失吗
已经有5人回复
» 抢金币啦！回帖就可以得到:
-
再中一个面上，散金币5000
+5/4035
-
面上中了，意料之外
+3/1285
-
面上中啦
+2/161
-
有幸中面上，特来还愿
+5/95
-
面上中了
+1/62
-
面上已中，感谢大家。
+1/48
-
散金币
+1/48
-
散金感谢小木虫
+1/45
-
材料微缺陷表征之正电子湮没寿命谱
+1/37
-
四川大学周加境课题组招2027年博士研究生/研究助理（自组装材料/生物医学方向）
+1/20
-
西南交通大学高速列车服役安全与冲击防护创新研究团队招收2027级硕士研究生
+1/8
-
北京理工大学数据流体团队诚聘博士后
+1/8
-
香港城市大学分子电子学方向招收2027年秋季入学博士生
+1/7
-
深圳大学何传新课题组诚聘博士后、（副）研究员
+1/6
-
中科院大连化学物理研究所 招聘 催化剂研发方向 科研助理 2名
+1/4
-
深圳大学何传新课题组诚聘博士后、（副）研究员
+1/4
-
深圳大学何传新课题组诚聘博士后、（副）研究员
+1/2
-
【科研实践合作】邀请老师带学生完成一次严谨的科学表达
+1/2
-
重大突破！酶法合成破解生物法DNA合成原料“卡脖子”难题
+1/2
-
量子物理团队招收博士生与博士后
+1/1
★ ★ ★
完了(金币+1):谢谢参与
rainwander(金币+2):很详细啊，鼓励积极参与交流~~~ 2011-01-14 14:18:35
完了(金币+1):谢谢参与
rainwander(金币+2):很详细啊，鼓励积极参与交流~~~ 2011-01-14 14:18:35
|
一般应该都是质粒吧，但是要看目的基因所在的质粒是什么质粒。如果是已经构建好的双元载体，那直接摇起来，提了质粒，转到农杆菌里就行 要是只是一般的克隆用的大肠的质粒，那要提了质粒，把目的基因切下来或者P下来，然后连到双元载体上，转化大肠，挑克隆提质粒验证正确之后再转到农杆菌里 如果确实目的基因是在菌的染色体上，那就得先P，连克隆载体，再做亚克隆到双元载体上转化农杆菌。 具体哪种情况问问那个外单位，肯定是知道的。 至于质粒转化农杆菌，原理没什么特别的，和转大肠一样，只不过制备感受态的溶液氯化钙浓度不太一样，要低一些。另外就是大肠是冰浴、42热激，农杆菌是液氮冷冻，37热激。另外复苏、培养时间什么的也要延长 |
2楼2011-01-14 13:39:45
3楼2011-01-14 15:27:15
4楼2011-01-14 17:21:38
5楼2011-01-14 18:00:13
6楼2011-01-14 18:02:29
7楼2011-01-14 18:09:41
8楼2011-01-15 16:06:06
