24小时热门版块排行榜    

查看: 2842  |  回复: 11

love三人游

新虫 (初入文坛)

[求助] 我的转基因啊。。都半年了。。求助过表达

我做这个载体都半年了,还没结果,好不容易有结果了吧,还有突变。现在有四处突变,但是只有一处有氨基酸变化。这个没事吧,可以用作过表达吗?EXtaq怎么这么不给力啊。。。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

whb21

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
不知道你做的什么蛋白,一个氨基酸突变对蛋白活性影响不好说,得看突变成什么氨基酸,再有建议你用pfu或者pyr聚合酶,这两个是高保真的。
2楼2012-02-13 15:45:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
西瓜(金币+2, 专家考核): 实验要一步一步来,楼主悬了…… 2012-02-14 16:23:42
,表达基因之前就不测序看下么,都突变了......氨基酸哪怕突变一个都不行。即便是氨基酸没有突变,也要看同义突变是不是突变成了稀有密码子,会不会对表达有影响。
The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
3楼2012-02-13 16:41:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hyacinth326

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
采用定点突变的方法把他给变回来不就得了,很简单的~~~
4楼2012-02-13 16:48:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

love三人游

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
楼: Originally posted by brightfuture01 at 2012-02-13 16:41:18:
,表达基因之前就不测序看下么,都突变了......氨基酸哪怕突变一个都不行。即便是氨基酸没有突变,也要看同义突变是不是突变成了稀有密码子,会不会对表达有影响。

同义突变是不是突变成了稀有密码子??这句话是什么意思啊?
5楼2012-02-13 20:19:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

love三人游

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
楼: Originally posted by hyacinth326 at 2012-02-13 16:48:11:
采用定点突变的方法把他给变回来不就得了,很简单的~~~

厄。。说的好简单吧。应该不会吧
6楼2012-02-13 20:19:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我爱沈泉

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
用高保真酶p出自己的片段啦 。。。。还要测序检查
7楼2012-02-13 20:20:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hyacinth326

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

西瓜(金币+2): 鼓励应助 2012-02-14 16:24:15
引用回帖:
6楼: Originally posted by love三人游 at 2012-02-13 20:19:20:
厄。。说的好简单吧。应该不会吧

是把一个基因连在质粒上吧?设计一对引物,引物中间包含你要突变的点,上下游引物完全互补,然后把整个质粒p下来,用DpnI酶将模板质粒消化掉将PCR产物直接转化就可以了。如果基因是在质粒上就是很简单啊~~~~
8楼2012-02-14 09:23:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gandalf886

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
love三人游(金币+2): 2012-02-14 17:58:52
extaq是非常不靠谱的
9楼2012-02-14 16:07:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ganchao1776

至尊木虫 (职业作家)

你就表达一下试试吧,反正又不是很麻烦,说不还会有好的结果呢
10楼2012-02-14 21:26:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 love三人游 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 4/200 2026-09-29 16:54 by yCO1Ll7aHtsw
[考博] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 4/200 2026-09-29 16:47 by yCO1Ll7aHtsw
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 4/200 2026-09-29 16:37 by etmYJ6d2rquH
[博后之家] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 3/150 2026-09-29 16:30 by etmYJ6d2rquH
[考博] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-29 15:46 by etmYJ6d2rquH
[博后之家] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-29 15:04 by etmYJ6d2rquH
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-29 14:58 by etmYJ6d2rquH
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 GDBe8tDZqE8z 2026-09-28 6/300 2026-09-29 14:41 by etmYJ6d2rquH
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 GDBe8tDZqE8z 2026-09-28 3/150 2026-09-29 14:30 by etmYJ6d2rquH
[找工作] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +6 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 6/300 2026-09-29 14:13 by etmYJ6d2rquH
[博后之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +6 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 7/350 2026-09-29 14:07 by etmYJ6d2rquH
[博后之家] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 3/150 2026-09-29 13:56 by etmYJ6d2rquH
[教师之家] 某top大学教授说“能够在市场中兑现的能力才是真能力”无比同意! +8 zju2000 2026-09-26 9/450 2026-09-29 13:47 by ahsoarli
[考研] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-29 09:59 by JzYBbHIXWSrW
[找工作] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 3/150 2026-09-29 06:28 by ZvyPK8n6Nfki
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-28 23:46 by b8fCuTHqckEt
[考研] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 GDBe8tDZqE8z 2026-09-28 3/150 2026-09-28 23:12 by b8fCuTHqckEt
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 CfXuS1rDhLYN 2026-09-28 4/200 2026-09-28 22:55 by ez6fGg9abYaj
[论文投稿] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 CfXuS1rDhLYN 2026-09-28 3/150 2026-09-28 19:08 by 9lS3ad5oOymn
[考研] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 4/200 2026-09-28 18:51 by 9lS3ad5oOymn
信息提示
请填处理意见