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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 转基因 » 我的转基因啊。。都半年了。。求助过表达
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love三人游

新虫 (初入文坛)

[求助] 我的转基因啊。。都半年了。。求助过表达

我做这个载体都半年了，还没结果，好不容易有结果了吧，还有突变。现在有四处突变，但是只有一处有氨基酸变化。这个没事吧，可以用作过表达吗？EXtaq怎么这么不给力啊。。。
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1楼 2012-02-13 13:46:57
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我爱沈泉

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
用高保真酶p出自己的片段啦 。。。。还要测序检查
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7楼2012-02-13 20:20:09
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whb21

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
不知道你做的什么蛋白，一个氨基酸突变对蛋白活性影响不好说，得看突变成什么氨基酸，再有建议你用pfu或者pyr聚合酶，这两个是高保真的。
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2楼2012-02-13 15:45:34
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
西瓜(金币+2, 专家考核): 实验要一步一步来，楼主悬了…… 2012-02-14 16:23:42
，表达基因之前就不测序看下么，都突变了......氨基酸哪怕突变一个都不行。即便是氨基酸没有突变，也要看同义突变是不是突变成了稀有密码子，会不会对表达有影响。
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The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
3楼2012-02-13 16:41:18
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hyacinth326

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
采用定点突变的方法把他给变回来不就得了，很简单的~~~
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4楼2012-02-13 16:48:11
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查看全部 12 个回答
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