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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】我是新手，请问T-DNA与RNAi的原理
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虫子739

铁虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】我是新手，请问T-DNA与RNAi的原理已有5人参与

我是新手，请问T-DNA与RNAi的关系，及原理，谢谢！~
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1楼2011-01-13 18:12:59
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real339

金虫 (正式写手)
★ ★ ★
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amisking(金币+2):鼓励发帖交流！ 2011-01-13 19:42:32
RNAi (RNA interference) 即RNA干涉，是近年来发现的在生物体内普遍存在的一种古老的生物学现象,是由双链RNA（dsRNA）介导的、由特定酶参与的特异性基因沉默现象,它在转录水平、转录后水平和翻译水平上阻断基因的表达。RNAi 广泛存在于从真菌到高等植物、从无脊椎动物到哺乳动物各种生物中。同时作为一项新兴生物技术，RNAi有着广泛的应用前景。本文主要论述了RNAi的发现、RNAi 的机理、RNAi的作用特点以及RNAi 的应用前景。
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天下没有免费的午餐
2楼2011-01-13 18:15:07
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real339

金虫 (正式写手)
★ ★
1949stone(金币+2):鼓励 2011-01-13 19:46:52
农杆菌Ti(tumor inducing)或Ri(root inducing)质粒中的一段DNA序列,可以从农杆菌中转移并稳定整合到植物核基因组中,已成为植物分子生物学中广泛应用的遗传转化载体。是Ti质粒上的片断，包含三个重要的基因，当整合到宿主细胞（主要是双子叶植物）时分别诱发根瘤，opine化合物的合成和抑制细胞分化。 Ti质粒因为自身一些优点很适合作为导入外源基因的载体。而外基因就是整合到T-DNA上的。
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天下没有免费的午餐
3楼2011-01-13 18:15:53
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fungixx

至尊木虫 (文坛精英)

优秀版主优秀版主优秀版主
★ ★ ★
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amisking(金币+2):鼓励发帖交流！ 2011-01-13 19:42:44
没啥关系吧！
Ｔ－ＤＮＡ是根癌农杆菌Ｔｉ质粒上的一个片段，在农杆菌侵染植物时能被切割下来，并整合到植物基因组中，所有见于植物表达载体。
ＲＮＡｉ是干扰RNA，接到基因沉默。
所以当在植物中想让某个基因沉默时，就会把相应的RNAi插入到植物表达载体中的T-DNA，转植物后，就能把T-DNA这段DNA转移到植物基因组中，其中的基因就会在植物中表达。。。。
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几年前踏上火车那一刻都还没有意识到,从此故乡只有冬夏,再无春秋
4楼2011-01-13 18:40:34
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虫子739

铁虫 (小有名气)

在植物基因突变种，T-DNA干扰和RNA干扰的关系？

感谢！~
题目有点没写清楚啊，我是在植物基因突变种，T-DNA干扰和RNA干扰的关系？:就像上面说的，RNA干扰技术也要通过T-DNA为载体吗？
为什么有些文献说T-DNA突变是随机的呢？怎样才能特定突变某个基因呢？
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5楼2011-01-13 22:40:19
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string1987

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
T-DNA 插入确实是随机的，现在还不能定向插入到某个基因中去。通常是大量随机插入T-DNA，建立突变体文库。然后进行测序，因为T-DNA是有标记的，可以通过测序大概知道插入的位置。等到你要研究某个基因时，就去突变体库买这个基因的突变体，回来以后筛选纯合子突变体，在测序，确认具体的插入位点。
RNAi 的突变体需要自己构建。选择目的基因的一段序列构建RNAi Ti质粒，也转入拟南芥中，筛选纯合子，虽然不能控制具体插入位点，但是只要看到起作用就好了。现在也只能做到这样了。
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现在的志向是一个文艺技术男，远大的志向是一个气质理论教授
6楼2012-05-13 12:40:49
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jakeSR

新虫 (小有名气)
★
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引用回帖:
6楼: Originally posted by string1987 at 2012-05-13 12:40:49
T-DNA 插入确实是随机的，现在还不能定向插入到某个基因中去。通常是大量随机插入T-DNA，建立突变体文库。然后进行测序，因为T-DNA是有标记的，可以通过测序大概知道插入的位置。等到你要研究某个基因时，就去突变体 ...

带有RNAi片段的T载体插入基因组会不会引起其他的基因突变呢?
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7楼2013-11-02 23:45:10
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