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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 【求助/交流】PCR产物克隆
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skyboyman

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】PCR产物克隆

新手！我用去QIAGEN PCR CLoning Kit克隆PCR产物（taq酶），总是克隆不上，不知道是什么原因？请大家帮帮忙，谢谢！
涂板接种后第二天有蓝白班，提DNA，消化，就是不出现我要的目的带，好郁闷啊！

[ Last edited by skyboyman on 2011-3-23 at 18:29 ]
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1楼 2011-03-21 23:39:28
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scelab

荣誉版主 (文坛精英)
没用过试剂盒，TA克隆都是手动，不懂，帮顶
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2楼2011-03-21 23:43:15
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gao-feng

铁杆木虫 (著名写手)
问问你的师兄姐，其实很简单的啊
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3楼2011-03-22 10:55:08
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rioarsenal

金虫 (正式写手)
产物纯化，链接T载体，转化E.coli 就ok了
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4楼2011-03-22 18:03:29
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rainwander

铁杆木虫 (知名作家)
★ ★
scelab(金币+2): 忽忽~~~ 2011-03-22 23:42:45
这个试剂盒没用过，

按照试剂盒说明书一步一步来就行了。

无非就是PCR，回收目的条带，连接载体，转化，

从头一步一步的找问题所在。
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5楼2011-03-22 19:24:51
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yyw30000

铜虫 (小有名气)
确认自己操作没问题的话，换所有试剂，不要找原因浪费时间了
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6楼2011-03-22 20:53:42
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rioarsenal

金虫 (正式写手)
还没弄出来么？好久没做实验了，看得我手都痒痒了。。
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7楼2011-03-23 08:08:32
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wallacelzh

铁杆木虫 (小有名气)
如果是为了找出失败的原因，可以用排除法；

如果只是为了做好实验，建议请同实验室的师兄师姐帮你做一次。
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8楼2011-03-23 09:38:26
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wallacelzh

铁杆木虫 (小有名气)
★
scelab(金币+1): 谢谢交流 2011-03-23 15:30:48
如果是为了找出失败的原因，可以用排除法；

如果只是为了做好实验，建议请同实验室的师兄师姐帮你做一次。
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9楼2011-03-23 09:45:56
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