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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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skyboyman

金虫 (小有名气)


[交流] 【求助/交流】PCR产物克隆

新手!我用去QIAGEN PCR CLoning Kit克隆PCR产物(taq酶),总是克隆不上,不知道是什么原因?请大家帮帮忙,谢谢!
涂板接种后第二天有蓝白班,提DNA,消化,就是不出现我要的目的带,好郁闷啊!

[ Last edited by skyboyman on 2011-3-23 at 18:29 ]
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没用过试剂盒,TA克隆都是手动,不懂,帮顶
2楼2011-03-21 23:43:15
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gao-feng

铁杆木虫 (著名写手)


问问你的师兄姐,其实很简单的啊
3楼2011-03-22 10:55:08
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rioarsenal

金虫 (正式写手)


产物纯化,链接T载体,转化E.coli 就ok了
4楼2011-03-22 18:03:29
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★ ★
scelab(金币+2): 忽忽~~~ 2011-03-22 23:42:45
这个试剂盒没用过,

按照试剂盒说明书一步一步来就行了。

无非就是PCR,回收目的条带,连接载体,转化,

从头一步一步的找问题所在。
5楼2011-03-22 19:24:51
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yyw30000

铜虫 (小有名气)


确认自己操作没问题的话,换所有试剂,不要找原因浪费时间了
6楼2011-03-22 20:53:42
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rioarsenal

金虫 (正式写手)


还没弄出来么?好久没做实验了,看得我手都痒痒了。。
7楼2011-03-23 08:08:32
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wallacelzh

铁杆木虫 (小有名气)


如果是为了找出失败的原因,可以用排除法;

如果只是为了做好实验,建议请同实验室的师兄师姐帮你做一次。
8楼2011-03-23 09:38:26
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wallacelzh

铁杆木虫 (小有名气)



scelab(金币+1): 谢谢交流 2011-03-23 15:30:48
如果是为了找出失败的原因,可以用排除法;

如果只是为了做好实验,建议请同实验室的师兄师姐帮你做一次。
9楼2011-03-23 09:45:56
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