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kiki1289

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】新手请问:引物浓度的问题已有3人参与

以下我跑PCR的反应体系:
2*PCR Mix 10μl
BOXAIR(30pmol)0.32μl;
DNA(50ng/ml)1.0μl;
双蒸水补足至20μl
我想问的是:BOXAIR引物的浓度为30pmol,这个浓度一般是指引物加入体系以前的浓度还是加入体系后的浓度?
谢谢
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yujiaping1

木虫 (著名写手)

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scelab(金币+1):欢迎多来交流!:tiger06: 2010-05-07 22:51:25
这里应该是加入前的体积,如果是加入后,那就只写终浓度就可以了,加多少就自己算,没有必要写终浓度后还写体积。而且,根据我们一般的PCR引物使用浓度看,这个也是加入前的体积
2楼2010-05-07 19:11:46
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墨香若水

木虫 (著名写手)

小小囧虫

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1949stone(金币+1):鼓励 2010-05-08 11:24:17
加入后的终浓度  终浓度为pmol  10pmol就够了
仕不可不弘毅,任重而道远
3楼2010-05-07 19:14:37
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yujiaping1

木虫 (著名写手)


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引用回帖:
Originally posted by 墨香若水 at 2010-05-07 19:14:37:
加入后的终浓度  终浓度为pmol  10pmol就够了

pmol是量的单位,不是浓度单位,你是指pmol/ul吧,那么终浓度应该没有10那么高,一般就是0.4左右l
4楼2010-05-07 19:48:19
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墨香若水

木虫 (著名写手)

小小囧虫

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scelab(金币+2):欢迎多来交流!:tiger06: 2010-05-08 10:40:18
引用回帖:
Originally posted by yujiaping1 at 2010-05-07 19:48:19:

pmol是量的单位,不是浓度单位,你是指pmol/ul吧,那么终浓度应该没有10那么高,一般就是0.4左右l

说错了:dnd:,引物的物质的量在10pmol.我用的25ul体系的话,那就是0.4pmol/ul  不过我50ul的体系也是这个量,效果也没什么差别,所以浓度在0.2-0.4pmol/ul应该都没问题。
仕不可不弘毅,任重而道远
5楼2010-05-08 09:30:48
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wywangying169

银虫 (小有名气)

应该是加入前的浓度,我一般做PCR时,引物浓度一般5P左右
好好自学,好好工作
6楼2010-05-21 16:31:11
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