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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 【求助/交流】苏云金芽孢杆菌（BT）质粒转化
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bitdeng

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】苏云金芽孢杆菌（BT）质粒转化已有4人参与

小弟刚进入实验室，在做BT的转化（BT-Ecoli穿梭质粒电击转化）时，总是先把质粒转入能去甲基化的大肠杆菌中（如ET，scs110），然后再转化到BT中。按理说细菌的限制修饰系统应该是切割去甲基化的外源DNA，可是为什么在转化时要先人为使质粒去甲基化。而且未去甲基化的载体很难转到BT中（本人并没有试过）。有知道的达人麻烦解惑，不甚感激！

[ Last edited by bitdeng on 2010-7-24 at 10:49 ]
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1楼2010-07-21 09:59:43
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gengce

金虫 (正式写手)
bitdeng(金币+1):多谢 2010-07-22 21:48:44
bitdeng(金币+1): 2010-07-22 21:52:20
大肠杆菌的修饰系统和Bt的修饰系统不一样，简单而言，构建好的质粒是已经修饰过的质粒（主要有甲基化），去甲基化后更能提高转化效率，bt的宿主菌更容易接受外来DNA。Ps你是哪个学校的也做Bt研究？
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2楼2010-07-22 15:30:24
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bitdeng

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by gengce at 2010-07-22 15:30:24:
大肠杆菌的修饰系统和Bt的修饰系统不一样，简单而言，构建好的质粒是已经修饰过的质粒（主要有甲基化），去甲基化后更能提高转化效率，bt的宿主菌更容易接受外来DNA。Ps你是哪个学校的也做Bt研究？

我农科院的，刚开始实验，发现很多不明白之处，希望能多多交流！此外，对于BT修饰系统，不知道有没有相关文献，希望不吝赐教。
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3楼2010-07-22 21:51:53
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gengce

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
哦，你是北京植保所的？还是湖北Bt中心的？
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4楼2010-07-23 13:10:41
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飞鸟514

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
2楼: Originally posted by gengce at 2010-07-22 15:30:24
大肠杆菌的修饰系统和Bt的修饰系统不一样，简单而言，构建好的质粒是已经修饰过的质粒（主要有甲基化），去甲基化后更能提高转化效率，bt的宿主菌更容易接受外来DNA。Ps你是哪个学校的也做Bt研究？

你好 我也在做苏云金杆菌质粒转化 转了一年也没转进 可否分享小弟下实验操作方法 不胜感激
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5楼2016-12-19 17:07:44
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飞翔的鱼干啊

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
2楼: Originally posted by gengce at 2010-07-22 15:30:24
大肠杆菌的修饰系统和Bt的修饰系统不一样，简单而言，构建好的质粒是已经修饰过的质粒（主要有甲基化），去甲基化后更能提高转化效率，bt的宿主菌更容易接受外来DNA。Ps你是哪个学校的也做Bt研究？

去甲基化后为什么更能提高转化效率啊？不懂这个怎么回事，能帮忙解释下吗？
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6楼2017-02-09 22:11:53
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