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amethyst967木虫 (正式写手)
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【求助/交流】求助：转基因植株鉴定的一些问题 已有2人参与
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我做转基因大豆的，接了一个师姐的材料，现在是T4代，老板让我验证转基因植株，并且做基因表达分析。我要做southern和RT，这是老板指定的，为了southern可以少做一些，我想先通过PCR来筛出转基因植株，可是我手里只有师姐的论文，没有阳性质粒。 我用了师姐论文里的引物、体系、程序，所有的都按她的PCR条件，但是得不到和她一样的结果。 现在我不知道该怎么做了，她所转进去的基因是大豆的一个内源基因，她截了三段，分别是928bp、435bp和2380bp，她用928bp和435bp的片段构了干扰载体，2380bp的片段构了过表达载体。 师姐论文里没有序列，只有登录号和引物，我按照她的引物找出来的序列与她标注的数字差十几bp，我就隔开这十几bp去重新设计引物，但是还是PCR不出结果，请各位高手指点一下，谢谢~ |
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