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cdongni

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】请教大家帮我分析一下 已有3人参与

请各位前辈帮我分析一下,我用Bradford法做蛋白质白准曲线,结果不稳定,只能达到一个9,, 一般也就是96左右,这都有哪些地方可能出问题了?我的酶标仪只能测570nm的吸光度,这对结果影响大吗?做标准去曲线时都要注意哪些细节啊?
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Rubisco580

金虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
plantaqp(金币+3):欢迎交流 2010-05-10 03:32:06
我认为可能的原因有这么几个:
1.考马斯亮蓝配制。配的时候溶解的情况怎样?
2.标准蛋白配制时候有没有出问题。
3.加入考马斯亮蓝后反应的时间。一般加考马斯亮蓝后15min开始测,最好30min内测完。
4.波长。我们都是用595nm测的。570nm没试过,不知道行不行。如果和最大吸收值相差不多应该没问题。

呃,暂时就这么多,欢迎各位批评指正。祝楼主以后曲线都三个九!
2楼2010-05-09 16:40:07
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cdongni

铜虫 (小有名气)

3楼2010-10-16 09:57:25
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piratenb

新虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
加样的时候小心点啊~~~~~
眼的世界
4楼2010-10-16 10:01:07
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