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cdongni

铜虫 (小有名气)

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[交流] 【求助/交流】请教大家帮我分析一下已有3人参与

请各位前辈帮我分析一下，我用Bradford法做蛋白质白准曲线，结果不稳定，只能达到一个9,，一般也就是96左右，这都有哪些地方可能出问题了？我的酶标仪只能测570nm的吸光度，这对结果影响大吗？做标准去曲线时都要注意哪些细节啊？

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1楼2010-05-09 16:25:08

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Rubisco580

金虫 (小有名气)

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★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
plantaqp(金币+3):欢迎交流 2010-05-10 03:32:06

我认为可能的原因有这么几个：
1.考马斯亮蓝配制。配的时候溶解的情况怎样？
2.标准蛋白配制时候有没有出问题。
3.加入考马斯亮蓝后反应的时间。一般加考马斯亮蓝后15min开始测，最好30min内测完。
4.波长。我们都是用595nm测的。570nm没试过，不知道行不行。如果和最大吸收值相差不多应该没问题。

呃，暂时就这么多，欢迎各位批评指正。祝楼主以后曲线都三个九！