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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 请教流式高手，帮我分析一下，我的流式图有什么问题么？
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qiang7

金虫 (小有名气)

[交流] 请教流式高手，帮我分析一下，我的流式图有什么问题么？

大家好，下面是我做的细胞凋亡的流式图，利用的是碧云天的试剂盒，想让大家帮我分析分，对照组和实验组有什么问题么？
实验组

对照组

[ Last edited by qiang7 on 2011-7-1 at 17:39 ]
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1楼2011-07-01 17:38:24
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跟师学徒

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
  走错地方了  顶一下吧
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2楼2011-07-01 21:51:49
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cxl_yll

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
同样走错，顶一下
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3楼2011-07-02 20:51:14
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zsy2010

银虫 (小有名气)
qiang7(金币+5): 谢谢 2011-07-03 23:54:57
我以为我能看懂一点点的。。。。
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4楼2011-07-02 22:39:11
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浪人利利

金虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
silicare(金币+5, EPI+1): 鼓励交流 2011-07-04 08:19:50
左下LL正常细胞；右下LR早期凋亡；右上UR晚期凋亡；左上UL坏死细胞

通过你的图和数据可以看出，对照组正常；实验组效果是有的，但是坏死细胞太多了，发国内文章够了；如果是要发外文文章，偶建议减少处理试剂的浓度，缩短处理时间试试看，最好的效果是凋亡细胞占大部分，而不是坏死细胞（UL），仅供参考
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5楼2011-07-03 14:30:13
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gwbk

木虫 (正式写手)
学习~~厉害啊
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6楼2011-07-04 00:37:16
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sykes

金虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
silicare(金币+5, EPI+1): 鼓励交流 2011-07-07 09:10:18
浪人利利   说的不准确。
右上是晚期凋亡和坏死细胞，左上是机械损伤细胞。
你的对照图是正常的，而实验组的图上象限细胞太多了，而且右上和左上其实是没分开的。导致结果比较可疑。

既然做流式了，就建议买BD等进口的annexin v/PI试剂盒，碧云天的试剂盒你相信他吗？
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7楼2011-07-06 20:29:07
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silicare

荣誉版主 (文坛精英)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
Originally posted by sykes at 2011-07-06 20:29:07:
浪人利利   说的不准确。
右上是晚期凋亡和坏死细胞，左上是机械损伤细胞。
你的对照图是正常的，而实验组的图上象限细胞太多了，而且右上和左上其实是没分开的。导致结果比较可疑。

既然做流式了，就建议买 ...

左上的是个老问题了，到现在我都没见过哪个官方的或权威的敢给他下个定义。机械也好，坏死也好，理论上都能说的过去
毕竟流式对碎片的区分能力还是有限的
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8楼2011-07-07 09:15:18
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a83875785

铁杆木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
好帖子，本来不懂FACS的，我们用的是accuri 的 facs,可惜没有中文说明书，谁能发一份我
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9楼2011-07-07 14:14:16
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mengmenglu

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
同意浪人利利的说法，我们也是这么理解的。
一般我们用凯基或BD公司的试剂盒，跑出来的结果都不错。

流式博大精深，不知有没有一个专门的版块来讨论呢？
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10楼2011-07-07 15:22:59
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jhu132llh

荣誉版主 (知名作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
Originally posted by silicare at 2011-07-07 09:15:18:
左上的是个老问题了，到现在我都没见过哪个官方的或权威的敢给他下个定义。机械也好，坏死也好，理论上都能说的过去
毕竟流式对碎片的区分能力还是有限的

左上的还是说是机械损伤细胞的要多一点
但是确实是没法区分到底就是损伤细胞还是坏死细胞
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11楼2011-07-07 15:35:55
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silicare

荣誉版主 (文坛精英)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
Originally posted by jhu132llh at 2011-07-07 15:35:55:
左上的还是说是机械损伤细胞的要多一点
但是确实是没法区分到底就是损伤细胞还是坏死细胞

细胞坏死就要看他的程度了，有完整的细胞结构的八成还是会跑到右上↗去的

同样机械损伤也要看程度，没有破坏膜结构却又改变通透性的这种损伤也应该不会很多吧
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12楼2011-07-07 17:15:29
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子曰包子好吃

银虫 (小有名气)
顶下！！！！
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13楼2011-07-21 19:10:09
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yilan77543

铜虫 (小有名气)
★
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做过胞内和多聚体染色  就是没做过这个凋亡 我很想弱弱地问 你这个是什么细胞啊
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14楼2012-11-08 21:10:28
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supernetcat

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
貌似挖坟。。。。

首先物理图FSC/SSC电压没调好，减少FSC和SSC电压，使细胞在图中央成团
然后PI通道（估计是FL3）往下调，AnnixinV电压需要增大，最后调整十字门位置把双阴性细胞框好就OK

基本上碎片已被物理图的R1分开了，因此可以直接分析右侧荧光图。
对照组状态很好，死的也少；
实验组就是晚期凋亡比较多，基本没看见早期凋亡，可试试降低药物刺激浓度或者给药时间，如非必要别固定细胞，直接上
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15楼2015-08-19 12:09:14
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