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eadchris

木虫 (正式写手)


[交流] 帮忙分析指纹图谱流动相问题(附有谱图和色谱条件)

我的样品做指纹图谱,用的是乙腈/0.4%磷酸,0~70min梯度。得到如下色谱图。
请问我的流动相该如何调整?
如果我用327nm作为检测波长,其响应值会不会太小。
谢谢。
254nm



327nm
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tyjackie

木虫 (正式写手)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
eadchris(金币+1): 2011-09-20 15:46:56
个人感觉327nm比较好啊
3楼2011-07-22 10:13:04
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eadchris

木虫 (正式写手)


引用回帖:
Originally posted by tyjackie at 2011-07-22 10:13:04:
个人感觉327nm比较好啊

但是会不会响应值太小了啊?我试着把浓度调大,但是就出现分不开得情况了。如果我用254的,该如何调整流动相啊?
谢谢。
4楼2011-07-22 10:24:34
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jinbo7

铁杆木虫 (正式写手)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
eadchris(金币+1): 谢谢。 2011-07-22 13:57:04
eadchris(金币+1): 2011-09-20 15:47:03
327nm是要好些,如果有条件可以用DAD检测一下,比较一下几个主要波长处色谱峰的响应情况,然后确定最佳波长,流动相的变化不好说,lz没有具体比例,也不知是否0-70min等线性洗脱,不过看图2中39-67分钟处出峰较少,而分析时间较长,可以在这一区间适当调整有机相比例。
5楼2011-07-22 10:34:04
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李liza

金虫 (正式写手)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
eadchris(金币+1): 谢谢。 2011-07-22 13:56:54
eadchris(金币+1): 2011-09-20 15:47:28
你的目标峰是哪几个,然后再定吧。这样看似看不出什么来的,
6楼2011-07-22 10:51:02
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9001000

金虫 (正式写手)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
eadchris(金币+2): 谢谢。 2011-07-22 13:56:39
eadchris(金币+3): 2011-09-20 15:47:17
其实做指纹图谱应该考虑的问题很多,比如说柱子,流动相,检测波长,柱温箱温度等等。不能说327nm相对整洁就说好,相对整洁是因为该波长下很多成分没有吸收,所以不能显示出来,因此,应该选择峰较多、峰面积比较大、分离度比较好的图谱,然后进一步优化。
另外,洗脱条件中溶剂也不可能同一种梯度,而是采用不同时间段不同梯度,这样效果才会更好。
建议还是多找些相关资料看看吧,比如果德安教授、李国强教授实验室发的文章,对你应该有用。
7楼2011-07-22 11:27:23
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eadchris

木虫 (正式写手)


感谢各位。
8楼2011-07-22 16:25:32
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简单回复
eadchris2楼
2011-07-22 08:29   回复  
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