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xibei1s985

铁虫 (正式写手)

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[求助] 液相测试流动相问题。。。

如何配制流动相
用HPLC法测定血清中氯氮平流动相如何配制？谢谢

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1楼2012-03-21 00:38:02

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痴夷子皮

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【答案】应助回帖

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药典方法：
【检查】有关物质取本品约25mg，置50ml量瓶中，加甲醇10ml，超声5分钟使溶解，用流动相稀释至刻度，摇匀；精密量取5ml，置25ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。精密量取供试品溶液1ml，置100ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液；另取本品约10mg，加0.1mol/L盐酸溶液5ml使溶解，于90℃水浴加热2小时后，冷却，转移至100ml量瓶中，加水15ml，加甲醇稀释至刻度，摇匀，取10ml，加供试品溶液10ml，混匀，作为分离度试验溶液。照高效液相色谱法（附录Ⅴ D）测定，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充柱，以甲醇-0.4%三乙胺溶液（70∶30）为流动相；检测波长为257nm。取分离度试验溶液20μl注入液相色谱仪，记录色谱图，氯氮平色谱峰与相邻色谱峰的分离度应符合规定。取对照溶液20μl注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高约为满量程的20%～25%。精密量取供试品溶液与对照溶液各20μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的2.5倍。供试品溶液的色谱图中如有杂质峰，最大杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积的0.3倍（0.3%），各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的0.6倍（0.6%）。

流动相配置后，过滤即可。