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husanankeyi

新虫 (小有名气)

[求助] 液相分析 流动相出峰发现问题了。。。。

黄酮液相问题
我在跑黄酮粗提物液相,发现一个问题,不管我怎么变化流动相比例,在3分钟左右,都有一个很大的峰,然后其他的地方就没有峰啦。还有就是我跑完后,冲柱子的时候,检测器也可以检测到很很漂亮的峰,而且还分得很好。求解释?

色谱条件!
0-10min 10%-20% A  
10-20min 20% A
20-25min 20%-30% A
25-35min 30%-33% A
35-40min 33%-40% A
40-60min 40%-60% A
A 乙睛  B 0.1%甲酸水溶液  30℃  20uL 0.8mL/min
waters 2695 C18 4.6mm*250mm
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痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★
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408851978(金币+1): 常来看看 2012-03-09 17:57:14
3min就出峰了,后面的梯度意义不大了。
估计分析方法问题,要不就是你的样品问题。
把乙腈换为甲醇,5%甲醇跑跑看怎样。
守候在风中的宁静。
2楼2012-03-06 16:48:33
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lihuan0525

金虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
波长是多少,有可能是溶剂峰啊
3楼2012-03-06 17:27:54
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永恒国度

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
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408851978(金币+1): 鼓励应助 2012-03-09 17:57:35
250mm的柱子,3分钟左右就是个死时间的溶剂峰,
请问你的提取物用什么溶的 检测波长是多少?如果是DMSO溶的,溶剂峰响应太大,可能就把其他的化合物峰都盖下去了,把图拉大看下

也有可能是你的化合物极性较弱,保留较强,乙腈到60%还没有洗脱下来,摸条件的时候先走个到95%的大梯度,看看样品的大致保留情况 再来优化梯度
4楼2012-03-06 17:50:46
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liufawen

荣誉版主 (文学泰斗)

发哥早已不在江湖...

文献杰出贡献文献杰出贡献优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
是溶剂峰吧,单独拿溶剂测下试试
Thebestlifeisnomorethanchattinglaughingoutloudduringtheday,andhavingagoodsleepatnight.
5楼2012-03-07 08:10:15
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latao

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
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408851978(金币+1): 鼓励应助 2012-03-09 17:57:48
可能是溶剂峰。
LZ是属于方法开发阶段吗?建议走以下梯度:
       Water     ACN
0.0min      95%     5%
20.0min      5%     95%
30.0min      5%     95%
30.01min    95%     5%
40.0min      95%     5%
初步判断化合物出峰时间,估算此时梯度%,建议以+/-5%比例微调。
还有LZ,走完梯度是要平衡色谱柱子的。
When one is about to act,one must reason first
6楼2012-03-07 12:41:39
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