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husanankeyi

新虫 (小有名气)

[求助] 液相分析 流动相出峰发现问题了。。。。

黄酮液相问题
我在跑黄酮粗提物液相,发现一个问题,不管我怎么变化流动相比例,在3分钟左右,都有一个很大的峰,然后其他的地方就没有峰啦。还有就是我跑完后,冲柱子的时候,检测器也可以检测到很很漂亮的峰,而且还分得很好。求解释?

色谱条件!
0-10min 10%-20% A  
10-20min 20% A
20-25min 20%-30% A
25-35min 30%-33% A
35-40min 33%-40% A
40-60min 40%-60% A
A 乙睛  B 0.1%甲酸水溶液  30℃  20uL 0.8mL/min
waters 2695 C18 4.6mm*250mm
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永恒国度

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
408851978(金币+1): 鼓励应助 2012-03-09 17:57:35
250mm的柱子,3分钟左右就是个死时间的溶剂峰,
请问你的提取物用什么溶的 检测波长是多少?如果是DMSO溶的,溶剂峰响应太大,可能就把其他的化合物峰都盖下去了,把图拉大看下

也有可能是你的化合物极性较弱,保留较强,乙腈到60%还没有洗脱下来,摸条件的时候先走个到95%的大梯度,看看样品的大致保留情况 再来优化梯度
4楼2012-03-06 17:50:46
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