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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 帮忙分析指纹图谱流动相问题（附有谱图和色谱条件）
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eadchris

木虫 (正式写手)

[交流] 帮忙分析指纹图谱流动相问题（附有谱图和色谱条件）

我的样品做指纹图谱，用的是乙腈/0.4%磷酸，0~70min梯度。得到如下色谱图。
请问我的流动相该如何调整？
如果我用327nm作为检测波长，其响应值会不会太小。
谢谢。
254nm



327nm
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1楼 2011-07-21 09:14:49
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9001000

金虫 (正式写手)
★
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eadchris(金币+2): 谢谢。 2011-07-22 13:56:39
eadchris(金币+3): 2011-09-20 15:47:17
其实做指纹图谱应该考虑的问题很多，比如说柱子，流动相，检测波长，柱温箱温度等等。不能说327nm相对整洁就说好，相对整洁是因为该波长下很多成分没有吸收，所以不能显示出来，因此，应该选择峰较多、峰面积比较大、分离度比较好的图谱，然后进一步优化。
另外，洗脱条件中溶剂也不可能同一种梯度，而是采用不同时间段不同梯度，这样效果才会更好。
建议还是多找些相关资料看看吧，比如果德安教授、李国强教授实验室发的文章，对你应该有用。
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7楼2011-07-22 11:27:23
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tyjackie

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
eadchris(金币+1): 2011-09-20 15:46:56
个人感觉327nm比较好啊
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3楼2011-07-22 10:13:04
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eadchris

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by tyjackie at 2011-07-22 10:13:04:
个人感觉327nm比较好啊

但是会不会响应值太小了啊？我试着把浓度调大，但是就出现分不开得情况了。如果我用254的，该如何调整流动相啊？
谢谢。
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4楼2011-07-22 10:24:34
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jinbo7

铁杆木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
eadchris(金币+1): 谢谢。 2011-07-22 13:57:04
eadchris(金币+1): 2011-09-20 15:47:03
327nm是要好些，如果有条件可以用DAD检测一下，比较一下几个主要波长处色谱峰的响应情况，然后确定最佳波长，流动相的变化不好说，lz没有具体比例，也不知是否0-70min等线性洗脱，不过看图2中39-67分钟处出峰较少，而分析时间较长，可以在这一区间适当调整有机相比例。
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5楼2011-07-22 10:34:04
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