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王雨云

金虫 (小有名气)

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[交流] 【求助/交流】关于酵母X33电转的问题已有5人参与

最近做了几次电转酵母，都不成功。第一次是才开始做，第一次做的感受态好像污染了，电转一天后就长出类似于细菌的东东，接着做了一次感受态，电转一天后长了一颗类似酵母的菌，检测为阴性（按常规方法跑的菌落PCR，有很淡的目的条带，点样孔附近还有很亮的条带，估计是阴性，不知道这步是不是有问题）。前两次的感受态都好像培养过了一点，第三次算是正常的，再按前两次的条件转，3天了什么都没长。我的电转条件是2000v，3~5ms,80ul感受态加了10ul线性化后的质粒，郁闷中，请教实验室同门的同时也请虫友指教一下，谢谢！

[ Last edited by 王雨云 on 2010-4-29 at 09:27 ]

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1楼 2010-04-29 08:24:03

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hihoney

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专业: 病原细菌与放线菌生物学

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引用回帖:

Originally posted by 王雨云 at 2010-04-30 08:11:27:
不是新的，不过那是我第一次做感受态，可能操作中有什么问题吧。现在做了几次，没有这个问题了，但是就是长不出来，不长菌的原因太多了，实在是不知道从何下手，只有自己慢慢摸索了，不过还是欢迎大家把自己遇到的 ...

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