24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
查看: 2570  |  回复: 51
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

xpb2005

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】各位虫友帮我分析PCR图片已有29人参与





为什么我P完后一跑胶就成这种结果,是不是什么加多了,请大家分析分析。我的体系是:双蒸水15.7  ,10XBUFFER   2.5,DNTP  2.0,镁离子2.0,引物各1,酶0.3,模板0.5,总体系是25微升。我用这个体系前两天做出来了,别人用这个体系也出条带了,但第三天做出来就成这结果了。而且以前做出的现在也不出了,我跑胶时百分之2.0的胶,90伏跑50分钟。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shengwufenzi

金虫 (正式写手)

★ ★ ★
lstt09nk(金币+3):欢迎多多交流~~ 2010-04-24 12:39
我觉得是你的模板出问题了。可能是被污染降解了,建议你跑一下模板。如果没问题,那就可能是你的PCR体系或者程序出问题了。再者如果你模板的量加的太多,也会出现图中弥散的情况,可现在你根本就看不见有目的条带出现
5楼2010-04-24 10:57:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 52 个回答

goodwish

木虫 (正式写手)

木虫书呆子

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
1949stone(金币+1): 2010-04-30 10:24
PCR牵扯的因素很多,寻找原因很难,再做一遍吧。
模板用错了、退火温度太高、引物少加一条、酶的活性有问题等都有可能
生命的海洋里,我是蓝色的一滴
2楼2010-04-24 10:43:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xpb2005

银虫 (小有名气)


1949stone(金币+1):? 2010-04-30 10:24
模板浓度会导致P不出来吗?别人说我跑胶的电压太低了,产物降解了,我觉得应该不会在跑胶时降解吧,这种可能性太小了吧
3楼2010-04-24 10:48:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xpb2005

银虫 (小有名气)

为什么泳道会全白呢?
4楼2010-04-24 10:49:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复(可上传附件)
信息提示
请填处理意见