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xpb2005

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】各位虫友帮我分析PCR图片 已有29人参与





为什么我P完后一跑胶就成这种结果,是不是什么加多了,请大家分析分析。我的体系是:双蒸水15.7  ,10XBUFFER   2.5,DNTP  2.0,镁离子2.0,引物各1,酶0.3,模板0.5,总体系是25微升。我用这个体系前两天做出来了,别人用这个体系也出条带了,但第三天做出来就成这结果了。而且以前做出的现在也不出了,我跑胶时百分之2.0的胶,90伏跑50分钟。
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xpb2005

银虫 (小有名气)

为什么泳道会全白呢?
4楼2010-04-24 10:49:11
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goodwish

木虫 (正式写手)

木虫书呆子

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
1949stone(金币+1): 2010-04-30 10:24
PCR牵扯的因素很多,寻找原因很难,再做一遍吧。
模板用错了、退火温度太高、引物少加一条、酶的活性有问题等都有可能
生命的海洋里,我是蓝色的一滴
2楼2010-04-24 10:43:32
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xpb2005

银虫 (小有名气)


1949stone(金币+1):? 2010-04-30 10:24
模板浓度会导致P不出来吗?别人说我跑胶的电压太低了,产物降解了,我觉得应该不会在跑胶时降解吧,这种可能性太小了吧
3楼2010-04-24 10:48:31
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shengwufenzi

金虫 (正式写手)

★ ★ ★
lstt09nk(金币+3):欢迎多多交流~~ 2010-04-24 12:39
我觉得是你的模板出问题了。可能是被污染降解了,建议你跑一下模板。如果没问题,那就可能是你的PCR体系或者程序出问题了。再者如果你模板的量加的太多,也会出现图中弥散的情况,可现在你根本就看不见有目的条带出现
5楼2010-04-24 10:57:06
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