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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » western blot 转膜问题
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清草XC

金虫 (正式写手)

[求助] western blot 转膜问题已有1人参与

最近在做蛋白印迹，转膜存在问题，如下图所示，我点了两个marker，最左边和中间的，转膜后能看到最左边的maker转到膜上了，但是中间的maker没有转过去，且用丽春红染色膜上样品无蛋白条带，用考马斯亮蓝对胶进行染色发现还有部分蛋白残留在胶上，主要集中在胶的中间部分，如下图所示：（转膜条件：300V,260mA,80min, 硝酸纤维素膜）请大家帮我分析下是怎么回事啊？

western blot 转膜问题
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1楼2016-12-20 21:38:29
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清草XC

金虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by zhuozhuo22 at 2017-01-09 22:57:37
我也 遇到相同的问题，请问你是怎么解决的？是什么原因造成的呢？

增加滤纸的厚度，六层滤纸，转膜条件是300v,300ma, 80min, 目的蛋白43kDa.
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8楼2017-01-10 21:57:40
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)
找有经验的做一次就行了
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2楼2016-12-21 16:55:18
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一个不小心就

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2016-12-21 16:55:18
找有经验的做一次就行了

这个方法好！最省时间
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3楼2016-12-21 19:28:02
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清草XC

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2016-12-21 16:55:18
找有经验的做一次就行了

问题已解决
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4楼2016-12-24 10:11:01
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