应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » western blot 转膜问题
101/1返回列表
查看: 2063  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

清草XC

金虫 (正式写手)

[求助] western blot 转膜问题 已有1人参与

最近在做蛋白印迹，转膜存在问题，如下图所示，我点了两个marker，最左边和中间的，转膜后能看到最左边的maker转到膜上了，但是中间的maker没有转过去，且用丽春红染色膜上样品无蛋白条带，用考马斯亮蓝对胶进行染色发现还有部分蛋白残留在胶上，主要集中在胶的中间部分，如下图所示：（转膜条件：300V,260mA,80min, 硝酸纤维素膜）请大家帮我分析下是怎么回事啊？

western blot 转膜问题
8F62627DF6528D8BC8CEAF73E71C199C.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2016-12-20 21:38:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)
找有经验的做一次就行了
赞一下 回复此楼
2楼2016-12-21 16:55:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

一个不小心就

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2016-12-21 16:55:18
找有经验的做一次就行了

这个方法好！最省时间
赞一下 回复此楼
3楼2016-12-21 19:28:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

清草XC

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2016-12-21 16:55:18
找有经验的做一次就行了

问题已解决
回复此楼
4楼2016-12-24 10:11:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

star013

新虫 (知名作家)
西门吹雪170: 屏蔽内容, 禁止发布商业性回帖 2016-12-24 21:18:53
本帖内容被屏蔽
5楼2016-12-24 13:55:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhuozhuo22

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
2楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2016-12-21 16:55:18
找有经验的做一次就行了

我也 遇到相同的问题，请问你是怎么解决的？是什么原因造成的呢？
赞一下 回复此楼
6楼2017-01-09 22:56:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhuozhuo22

新虫 (初入文坛)
西门吹雪170: 应助指数-1, 无应助 2017-01-10 07:43:56
我也 遇到相同的问题，请问你是怎么解决的？是什么原因造成的呢？
赞一下 回复此楼
7楼2017-01-09 22:57:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

清草XC

金虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by zhuozhuo22 at 2017-01-09 22:57:37
我也 遇到相同的问题，请问你是怎么解决的？是什么原因造成的呢？

增加滤纸的厚度，六层滤纸，转膜条件是300v,300ma, 80min, 目的蛋白43kDa.
赞一下(1人) 回复此楼
8楼2017-01-10 21:57:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhuozhuo22

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 清草XC at 2017-01-10 21:57:40
增加滤纸的厚度，六层滤纸，转膜条件是300v,300ma, 80min, 目的蛋白43kDa....

300mA会不会太大了啊？我一般只用200MA，时间80-90分。转的也挺好的。滤纸是前后各三张，共6张。最近就出这样的问题，转完NC膜上中间部分有，上下都没有（以前是都有，能转100KD的），胶上的情况和你的MARKER右边的那两条一样，只是迷糊的蓝色，条带不清晰，感觉蛋白分散了一样。不知都哪里出问题了，条件没怎么改变，就是变得不顺利，时好时坏，像是碰运气。真是伤透心了。
赞一下 回复此楼
9楼2017-01-17 21:37:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

默阳希希

新虫 (小有名气)
我用120v啊，300是多大啊，不敢想象。

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
10楼2017-04-30 11:24:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 清草XC 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 281求调剂 +4 Koxui 2026-03-24 5/250 2026-03-25 11:38 by userper
[考研] 0854电子信息求调剂 324 +4 Promise-jyl 2026-03-23 4/200 2026-03-25 11:36 by Sugarlight
[考研] 284求调剂 +14 Zhao anqi 2026-03-22 14/700 2026-03-25 10:40 by userper
[考研] 上海电力大学材料防护与新材料重点实验室招收调剂研究生（材料、化学、电化学，环境） +4 我爱学电池 2026-03-23 4/200 2026-03-25 00:59 by 1027_324
[考研] 0854AI CV方向招收调剂 +3 章小鱼567 2026-03-23 3/150 2026-03-24 20:25 by 汪！？！
[考研] 求调剂 +6 研研，接电话 2026-03-24 7/350 2026-03-24 17:01 by barlinike
[考研] 求调剂 +7 十三加油 2026-03-21 7/350 2026-03-23 23:48 by 热情沙漠
[考研] 341求调剂(一志愿湖南大学070300) +5 番茄头--- 2026-03-22 6/300 2026-03-23 23:45 by Txy@872106
[考研] 一志愿陕师大生物学071000，298分，求调剂 +3 SYA！ 2026-03-23 3/150 2026-03-23 19:09 by macy2011
[考研] 336求调剂 +4 收到VS 2026-03-20 4/200 2026-03-23 19:02 by macy2011
[考研] 一志愿上海交大生物与医药专硕324分，求调剂 +5 jiajunX 2026-03-22 5/250 2026-03-23 18:07 by YMU施老师
[考研] 一志愿东华大学化学070300，求调剂 +7 2117205181 2026-03-21 8/400 2026-03-22 22:55 by chixmc
[考研] 求调剂一志愿海大，0703化学学硕304分，有大创项目，四级已过 +6 幸运哩哩 2026-03-22 10/500 2026-03-22 20:10 by edmund7
[考研] 311求调剂 +3 26研0 2026-03-20 3/150 2026-03-22 14:46 by ColorlessPI
[考研] 269专硕求调剂 +6 金恩贝 2026-03-21 6/300 2026-03-22 14:31 by ColorlessPI
[考研] 297求调剂 +3 喜欢还是不甘心 2026-03-20 3/150 2026-03-21 18:33 by 学员8dgXkO
[考研] 279求调剂 +5 红衣隐官 2026-03-21 5/250 2026-03-21 14:59 by lature00
[考研] 304求调剂 +6 曼殊2266 2026-03-18 6/300 2026-03-21 00:32 by JourneyLucky
[考研] 材料与化工 322求调剂 +4 然11 2026-03-19 4/200 2026-03-20 22:12 by luoyongfeng
[考研] 320求调剂0856 +3 不想起名字112 2026-03-19 3/150 2026-03-19 22:53 by 学员8dgXkO
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭