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Western Blot 转膜相关问题
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刚刚接触实验，最近Western总是在转膜上出问题。 我们用的是NC膜，湿转，100V，1.5h。 10*转膜液：tris 151.1g，甘氨酸30.3g，定容至1000ml 最开始几次，用之前剩下的10*转膜液，一切正常，起始电压就能到达100V，电流在250mA，最后电流也不超过300mA。 自己配了一次转膜液后，电压一开始总是不能达到100V（90左右），就自动转成恒流了（我设置了最高电流300mV），今晚上更过分，电压只能到达70V，前10多分钟，电压逐渐下降到50V，之后慢慢上升最后维持在80V上下。 我转了2个小时，看maker的效果也还是不错。 我还是比较疑惑，为什么会有这样的电压变化。 转膜液有问题，还是温度，最开始转膜液温度稍高，慢慢被周围冰浴降低，电压上升？ 谢谢 |
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