应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 连接转化不长菌
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
731/8返回列表123456下一页末页
查看: 6826  |  回复: 72
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

zeyuanzi

新虫 (小有名气)

[求助] 连接转化不长菌 已有11人参与

昨天我做了4个转化。
1.未加卡那的感受态—长了大量密密麻麻的菌
2.加卡那的感受态—不长
3.加卡那未酶切质粒的感受态—不长
4.加卡那重组克隆感受态—不长
1说明感受态是活的，2说明卡那没失效，3说明质粒没导进去或质粒错误或感受态感受状态不好？
求大神有时间帮我看下

@wizardfan @youlinglyw 发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2016-10-16 11:50:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

781055707

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
载体构建这么简单，你找个师姐或师哥，请人吃几顿饭，就搞定了呀。有人请我吃饭，我三天就给你连完。
赞一下(2人) 回复此楼
采菊东篱下，悠然见南山。
11楼2016-10-17 08:33:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

朱庆平

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
一般转化的操作步骤简单，出现的问题也不大，如果非要说转化失败，最大的原因可能是你的感受态接收外来DNA的能力有问题；而综合3和4的结果来看，要么是你的质粒载体有问题，要么是你的感受态接受外来DNA的能力有问题，所以我建议你更换载体和感受态。感受态比起载体要便宜许多，所以先建议你更换感受态来做实验，如果结果还是不好，再更换载体吧！
赞一下(1人) 回复此楼
31楼2016-10-17 20:33:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

zeyuanzi

新虫 (小有名气)
质粒已去磷酸化回收，基因也酶切回收了

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
2楼2016-10-16 11:50:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zeyuanzi

新虫 (小有名气)
我只求帮我分析一下，问题出在哪，大致方向

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
3楼2016-10-16 12:00:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

不爱做实验

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-10-16 22:21:49
3说明质粒转化失败或者质粒状态不好
4说明构建失败，可能酶切、连接、转化出现问题

建议逐一排除可能的问题
赞一下 回复此楼
4楼2016-10-16 13:24:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zeyuanzi

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 不爱做实验 at 2016-10-16 13:24:12
3说明质粒转化失败或者质粒状态不好
4说明构建失败，可能酶切、连接、转化出现问题

建议逐一排除可能的问题

3质粒转化失败是感受态细胞的问题？4的因素好多，如何选一个方向入手

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
5楼2016-10-16 13:55:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zeyuanzi

新虫 (小有名气)
范围好大，谁能指导一下我的可能出错点？

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
6楼2016-10-16 14:50:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

黄小萌萌

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
确定一下，质粒是抗卡那的吗
赞一下 回复此楼
7楼2016-10-16 16:07:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zeyuanzi

新虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 黄小萌萌 at 2016-10-16 16:07:17
确定一下，质粒是抗卡那的吗

确定过了，是

发自小木虫Android客户端
回复此楼
8楼2016-10-16 18:12:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zeyuanzi

新虫 (小有名气)
求解答

发自小木虫Android客户端
回复此楼
9楼2016-10-16 21:15:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zeyuanzi

新虫 (小有名气)
求解答，要不，毕不了业了

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
10楼2016-10-17 08:21:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 zeyuanzi 的主题更新
731/8返回列表123456下一页末页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 265求调剂 +4 林深温澜 2026-04-01 6/300 2026-04-01 22:30 by 林深温澜
[考研] 273求调剂 +19 李芷新1 2026-03-31 19/950 2026-04-01 21:49 by chyhaha
[考研] 379求调剂 +3 ?苦瓜不苦 2026-04-01 3/150 2026-04-01 20:09 by 暮云清寒
[考研] 085600，材料与化工321分调剂 +5 大馋小子 2026-03-27 7/350 2026-04-01 15:13 by oooqiao
[考研] 一志愿中农0710生物学，微生物方向总分338求调剂 +3 柒xxxx. 2026-03-26 3/150 2026-04-01 12:30 by 冰乌龙
[考研] 086000生物与医药298调剂求助 +4 元元青青 2026-03-31 6/300 2026-04-01 11:13 by syh9288
[考研] 环境工程 085701，267求调剂 +15 minht 2026-03-29 16/800 2026-04-01 10:13 by li_sujuan99
[考研] 求0861交通运输专硕or材料专硕调剂 +4 勒布朗@ 2026-03-31 4/200 2026-04-01 09:54 by 一只好果子?
[考研] 349求调剂 +6 zwjjjjjj 2026-03-31 6/300 2026-04-01 09:16 by JourneyLucky
[考研] 0856调剂 +7 曲听筠 2026-03-30 7/350 2026-04-01 08:51 by JourneyLucky
[考研] 考研调剂求助 +7 13287130938 2026-03-31 7/350 2026-03-31 16:39 by 690616278
[考研] 物理学调剂 +4 小羊36 2026-03-30 4/200 2026-03-31 16:16 by lishahe
[考研] 293分求调剂，外语为俄语 +5 加一一九 2026-03-31 5/250 2026-03-31 09:39 by zhshch
[考研] 323分 食品与营养调剂 +3 嘿ooo 2026-03-31 3/150 2026-03-31 09:38 by longlotian
[考研] 303求调剂 +7 DLkz1314. 2026-03-30 7/350 2026-03-30 16:05 by shuang5186
[考研] 环境科学与工程334分求调剂 +6 王一一依依 2026-03-30 8/400 2026-03-30 11:52 by yjolah
[考研] 296求调剂 +10 彼岸t 2026-03-29 10/500 2026-03-30 10:50 by 探123
[考研] 343求调剂085601 +3 要努力学习x 2026-03-29 3/150 2026-03-29 18:35 by wxiongid
[考研] 一志愿南京航空航天大学材料学硕求调剂 +3 @taotao 2026-03-28 3/150 2026-03-28 10:26 by JourneyLucky
[考研] 321求调剂 +6 wasdssaa 2026-03-26 6/300 2026-03-26 20:57 by sanrepian
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭