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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 连接转化不长菌
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781055707

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
载体构建这么简单，你找个师姐或师哥，请人吃几顿饭，就搞定了呀。有人请我吃饭，我三天就给你连完。
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采菊东篱下，悠然见南山。
11楼2016-10-17 08:33:33
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dingxianlo

金虫 (正式写手)
我以前出现过能长出菌但是小摇和大摇摇不出来，后来经过排除是感受态细胞出问题了，换了种方法做感受态细胞就行了。

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未来掌握在自己手中，希望通过这个网站认识更多的朋友，能在学习、工作、生活上相互帮忙。爱拼才会赢！
12楼2016-10-17 08:38:37
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dingxianlo

金虫 (正式写手)
我当时转的是农杆菌，你如果转的不是农杆菌是大肠杆菌而且感受态细胞又是买的话我猜测可能是你载体没构建好。

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13楼2016-10-17 08:40:43
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zeyuanzi

新虫 (小有名气)
引用回帖:
11楼: Originally posted by 781055707 at 2016-10-17 08:33:33
载体构建这么简单，你找个师姐或师哥，请人吃几顿饭，就搞定了呀。有人请我吃饭，我三天就给你连完。

没师哥师姐了，他们都毕业了，我请你吃饭吧

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14楼2016-10-17 08:45:58
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zeyuanzi

新虫 (小有名气)
引用回帖:
13楼: Originally posted by dingxianlo at 2016-10-17 08:40:43
我当时转的是农杆菌，你如果转的不是农杆菌是大肠杆菌而且感受态细胞又是买的话我猜测可能是你载体没构建好。

3没导进去或是质粒的问题，好烦，感觉毕不了业了

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15楼2016-10-17 08:46:50
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dingxianlo

金虫 (正式写手)
我估计应该也是质粒问题。

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16楼2016-10-17 08:47:33
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zeyuanzi

新虫 (小有名气)
引用回帖:
16楼: Originally posted by dingxianlo at 2016-10-17 08:47:33
我估计应该也是质粒问题。

质粒我用试剂盒抽提的，电泳效果还好，有两条清楚的带

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17楼2016-10-17 08:51:06
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木立

新虫 (小有名气)
如果确定质粒有卡那抗性，感受态没问题，那就是转化过程出了问题

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18楼2016-10-17 08:52:38
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dingxianlo

金虫 (正式写手)
如果质粒有其他抗性基因的话可以换种抗生素试试。我可以考虑换个人做做试试，有时候一个人自己在做可能不知道哪个细节出错了。

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19楼2016-10-17 08:56:00
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dingxianlo

金虫 (正式写手)
打错字了，是你不是我……

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20楼2016-10-17 08:57:12
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