24小时热门版块排行榜

>论坛更新日志 (3606)
>导师招生 (591)
>考博 (154)
>文献求助 (124)
>虫友互识 (118)
>博后之家 (98)
>微米和纳米 (90)
>论文投稿 (47)
>学术会议 (40)
>硕博家园 (39)
>公派出国 (39)
>休闲灌水 (39)
>教师之家 (37)
>考研 (30)
>基金申请 (19)
>招聘信息布告栏 (18)

返回列表

你是我的唯一

银虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 216
帖子: 21
在线: 5.9小时
虫号: 2459915
注册: 2013-05-11
性别: GG
专业: 微生物学

[求助] 蛋白表达出现包涵体

在做蛋白表达的时候，结果全是包涵体
1、我的基因序列是经过密码子优化过的，基因序列没有稀有密码子。
2、按照之前文章上面的去做表达，全是包涵体。
3、优化过温度、转速、加葡萄糖、乙醇、甘油还是包涵体。
4、换过表达宿主BL21和Rosetta也全是包涵体。
请教各位大神，还该如何改进，才能减少包涵体?

回复此楼

» 猜你喜欢

售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急已经有9人回复
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急已经有8人回复
售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急已经有8人回复
售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急已经有8人回复
售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急已经有8人回复
售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急已经有11人回复
售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急已经有11人回复
售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急已经有6人回复
售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急已经有15人回复
售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急已经有13人回复

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

大肠杆菌培养时出现包涵体已经有5人回复
求助包涵体变性复性纯化用什么牌子的纯化试剂盒比较好，求推荐。已经有4人回复
原核表达蛋白时不加诱导剂也有目的蛋白表达，怎么回事？已经有2人回复
重组蛋白在BL21(DE3)中表达，存在包涵体已经有12人回复
原核表达蛋白复性的具体方案已经有14人回复
包涵体的洗涤已经有13人回复
蛋白纯化Ni-IDA柱子出现问题已经有20人回复
亲们，你们的包涵体蛋白透析会出现沉淀么，郁闷啊，能不能给只个招？？？已经有5人回复
关于蛋白多聚已经有6人回复
His Tag融合蛋白纯化已经有8人回复
蛋白表达中实验组与对照的诱导表达无明显差异，求高人指点。已经有2人回复
野生型大肠杆菌外源蛋白表达量不稳定的问题已经有3人回复
AMPK蛋白纯化问题讨论已经有21人回复
问一下蛋白表达中出现的问题~ 已经有7人回复
【求助/交流】你知道这些蛋白表达的问题吗？已经有3人回复
【求助/交流】蛋白质表达已经有5人回复
【分享】蛋白质纯化个人总结2 已经有38人回复
【求助/交流】原核表达蛋白纯化已经有29人回复

相信自己

1楼 2016-07-12 15:31:49

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

Edgel

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 62.3
红花: 1
帖子: 16
在线: 15.8小时
虫号: 2328508
注册: 2013-03-08
专业: 微生物生理与生物化学

引用回帖:

7楼: Originally posted by 小鼹鼠 at 2016-07-15 10:39:48
你好！请问你是怎么做的呢？有没有比较详细的protocol之类？我的蛋白也一直在沉淀里，我想尝试做一下复性。但是我们实验室也没人做过，怕一些细节问题我注意不到。可以分享一下吗？多谢~~...

有一本很大很厚书叫蛋白纯化指南，上面关于蛋白质的各种方法技术都可以查阅到。我当时做包涵体就是得益于它，不过不同的蛋白，其分子量、配体等各方面性质不一样，有些很容易复性，另一些很难复性。我比较幸运，第一次尝试就成功了，我是直接把包涵体溶解在8M的Urea中，然后透析，检测出足够的活性后再进行蛋白纯化。