5楼: Originally posted by hc-material at 2016-05-18 16:53:02
看电泳图，是可溶性表达啊，然后破碎是否彻底。
纯化出来不纯有各种原因：
1.柱子没平衡好。增加平衡的时间。
2.柱填料有问题换新的。
3.洗脱拉咪唑梯度太大，可以拉梯度更细一些。
4.非特异性吸附多，平衡缓冲 ...

3楼: Originally posted by 弘伟 at 2016-05-17 12:25:45
也许把第一次纯化出来的蛋白再过一次柱子，纯度会好一些，第二条比较亮的带有没有可能是由于这个蛋白有降解呀。