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新虫 (初入文坛)

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[求助] His标签蛋白纯化的问题已有4人参与

我的目的蛋白在40多，用的是pet-32a载体，诱导时间一般在五个小时左右。上清和包涵体都有表达，但是上清纯化出来多一个条带，而且蛋白并不纯，包涵体纯化多出来的那个条带不是那么明显。

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【求助/交流】急！急！急！ his标签表达的蛋白出问题了，求指导！！！已经有7人回复

1楼 2016-05-17 11:16:12

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引用回帖:

5楼: Originally posted by hc-material at 2016-05-18 16:53:02
看电泳图，是可溶性表达啊，然后破碎是否彻底。
纯化出来不纯有各种原因：
1.柱子没平衡好。增加平衡的时间。
2.柱填料有问题换新的。
3.洗脱拉咪唑梯度太大，可以拉梯度更细一些。
4.非特异性吸附多，平衡缓冲 ...

我用的碧云天的纯化试剂盒。请问下那个较小的带是不是标签掉了还是什么别的原因么？

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