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养鸡专业户

新虫 (初入文坛)

[求助] His标签蛋白纯化的问题 已有4人参与

我的目的蛋白在40多,用的是pet-32a载体,诱导时间一般在五个小时左右。上清和包涵体都有表达,但是上清纯化出来多一个条带,而且蛋白并不纯,包涵体纯化多出来的那个条带不是那么明显。

His标签蛋白纯化的问题


His标签蛋白纯化的问题-1


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miega

银虫 (小有名气)

楼主的图跑的太好了,请问用多少菌液点样量是多少?

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10楼2016-05-27 01:06:44
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查看全部 13 个回答

030Selma

金虫 (正式写手)

可溶蛋白非特异吸附,所以上清中多一些,包涵体少一些

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2楼2016-05-17 11:48:27
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弘伟

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
也许把第一次纯化出来的蛋白再过一次柱子,纯度会好一些,第二条比较亮的带有没有可能是由于这个蛋白有降解呀。
3楼2016-05-17 12:25:45
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周军威66

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我跟你的目的蛋白差不多,能挂上柱但是洗不下来,换了不同浓度的咪唑缓冲液还是不行。我的目的蛋白与上两届的师姐属于同一家族,她的就可以,我的就是不行,不知道为什么,求助!!!!!!!
研究生,游泳,羽球。
4楼2016-05-17 17:01:46
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