| 查看: 3046 | 回复: 17 | |||
[求助]
PCR扩不出条带
|
|||
|
扩一段3000多的片段 首先模版没问题，因为用这个模版扩其他的基因都扩出来了。 酶用的高保真的酶。 体系是 水 13微升 镁离子buffer 4微升 dNTP 1.6微升 F P 0.4微升 R P 0.4微升 模版 0.4微升 酶 0.2微升 程序是 98 2min 94 40s 50 40s 72 3min20s 72 7min 特别奇怪的一点是 ，我扩出来了一次，然后后来再也扩不出来。 而且电泳结果是任何条带都没有，连引物二聚体都没有。 这是怎么回事？ 发自小木虫IOS客户端 |
回复此楼» 猜你喜欢
含氟糖皮质激素的外用抗炎利器醋酸氟轻松
已经有0人回复
-
阿莫奈韦（Amenamevir）：解旋酶-引物酶靶向分子的结构特征与合成路径全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有85人回复
-
利瑞鲁单抗：靶向KIR的NK细胞检查点工具抗体，结构基础与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- PCR就是不出目的条带！！！！
已经有11人回复
- pcr怎样才能扩出15k以上的目的条带？
已经有13人回复
- 求助pcr扩增扩不出目的条带
已经有6人回复
- 菌落PCR通用引物扩不出条带，简并引物却有条带
已经有4人回复
- 重组PCR 扩不出来需要的条带
已经有3人回复
- 反转录后PCR扩不出目的条带
已经有26人回复
- PCR扩不出目的条带
已经有4人回复
- 高GC含量基因PCR扩增不出条带
已经有22人回复
- 连接载体转化后挑单菌落，菌落pcr扩出条带，但是摇菌摇不起来
已经有5人回复
- PCR扩不出条带
已经有1人回复
- 融合PCR扩增不出目的条带
已经有3人回复
- 设计了简并引物，PCR扩不出条带
已经有9人回复
- 质粒ＰＣＲ扩不出目的条带，且有杂带，但是直接测序有结果？为什么？？？？？
已经有7人回复
- pcr 扩不出目的带啊，求帮忙
已经有3人回复
- PCP扩不出目的条带
已经有0人回复
- PCR扩不出，电泳出现smearr,求解
已经有2人回复
- 求助啊~~~PCR有时候能扩出目的条带，有的时候不可以
已经有0人回复
- 多重PCR中一条引物之前可以扩出，现在扩不出，但是单重时又能扩出
已经有1人回复
- PCR一直扩不出目的条带
已经有10人回复
- PCR扩增不出条带
已经有9人回复
- PCR扩不出目的基因
已经有14人回复
|
可以看一下酶的说明书，高保真酶具有保真性，其实没必要使用，可能会降解掉模板和引物，你的2kb也不算长，一般的长片段可以扩增的长度是十几kb到二三十kb，你这也不需要，可以使用热启动Taq酶就可以，提高特异性灵敏度，但是你这个实验酶的问题好像还有其他原因，估计体系中就是没有扩增吧，不然引物二聚体都没有，你确定你的体系中充分有没有加全哦~ Taq酶的选择：http://www.detaibio.com/dna-taq-polymerase.html |
13楼2016-03-28 11:03:15
jifengyun321
新虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1147.8
- 散金: 570
- 红花: 3
- 帖子: 312
- 在线: 150.4小时
- 虫号: 3304811
- 注册: 2014-07-03
- 专业: 微生物生态学
2楼2016-03-26 23:13:12
3楼2016-03-27 16:55:03
jifengyun321
新虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1147.8
- 散金: 570
- 红花: 3
- 帖子: 312
- 在线: 150.4小时
- 虫号: 3304811
- 注册: 2014-07-03
- 专业: 微生物生态学
4楼2016-03-27 18:30:02
maixiaodaou
新虫 (小有名气)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 172.7
- 帖子: 79
- 在线: 9.8小时
- 虫号: 4042700
- 注册: 2015-08-29
- 性别: MM
- 专业: 植物遗传学
5楼2016-03-27 21:48:35
787719259
银虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1160.6
- 红花: 1
- 帖子: 174
- 在线: 74.1小时
- 虫号: 3938754
- 注册: 2015-06-24
- 专业: 病原真菌学
6楼2016-03-28 02:56:26
7楼2016-03-28 08:13:29
8楼2016-03-28 08:14:29
787719259
银虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1160.6
- 红花: 1
- 帖子: 174
- 在线: 74.1小时
- 虫号: 3938754
- 注册: 2015-06-24
- 专业: 病原真菌学
9楼2016-03-28 08:28:57
10楼2016-03-28 09:13:44
