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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » PCR扩不出条带
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pubblezhu

新虫 (初入文坛)

[求助] PCR扩不出条带

扩一段3000多的片段
首先模版没问题，因为用这个模版扩其他的基因都扩出来了。
酶用的高保真的酶。
体系是
水 13微升
镁离子buffer 4微升
dNTP 1.6微升
F P 0.4微升
R P 0.4微升
模版 0.4微升
酶 0.2微升
程序是
98 2min
94 40s
50 40s
72 3min20s
72 7min
特别奇怪的一点是 ，我扩出来了一次，然后后来再也扩不出来。
而且电泳结果是任何条带都没有，连引物二聚体都没有。
这是怎么回事？

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1楼 2016-03-26 19:39:20
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jifengyun321

新虫 (正式写手)
哦哦

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4楼2016-03-27 18:30:02
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jifengyun321

新虫 (正式写手)
你可以将一次PCR的产物为模板再次扩增看看，有条带吗

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2楼2016-03-26 23:13:12
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pubblezhu

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by jifengyun321 at 2016-03-26 23:13:12
你可以将一次PCR的产物为模板再次扩增看看，有条带吗

那次没回收……

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3楼2016-03-27 16:55:03
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maixiaodaou

新虫 (小有名气)
PCR仪有问题没？还有就是电泳时marker有条带没

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5楼2016-03-27 21:48:35
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